分子生物学_6-NXPowerLite幻灯片.pptVIP

6 分子生物学研究方法（下） ——基因功能研究技术 6.1 基因表达研究技术 基因表达系列分析技术 RNA的选择性剪接技术 原位杂交技术 基因定点突变技术 6.1.1基因表达系列分析技术 6.1.2 RNA的选择性剪接技术 RNA的选择性剪接是指用不同的剪接方式从一个mRNA前体产生不同的mRNA剪接异构体的过程。可分为：平衡剪切、5’选择性剪切、3’选择性剪切、外显子遗漏型剪切及相互排斥性剪切。常用RT-PCR法研究某个基因是否存在选择性剪切。 6.1.3 原位杂交技术 原位杂交（in situ hybridization, ISH）是用标记的核酸探针，经放射自显影或非放射检测体系，在组织、细胞、间期核及染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段，分为RNA和染色体原位杂交两大类。 RNA原位杂交用放射性或非放射性（如地高辛、生物素等）标记的特异性探针与被固定的组织切片反应，若细胞中存在与探针互补的mRNA分子，两者杂交产生双链RNA，可通过放射性标记或经酶促免疫显色，对该基因的表达产物做出定性定量分析。 荧光原位杂交（FISH）首先对寡核苷酸探针做特殊的修饰和标记，然后用原位杂交法与靶染色体或DNA上特定的序列结合，再通过与荧光素分子相耦联的单克隆抗体来确定该DNA序列在染色体上的位置。 6.1.4 基因定点突变技术 通过改变基因特定位点核苷酸序列来改变所编码的氨基酸序列，