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蛹虫草人工代料栽培技术 　　摘要 蛹虫草含多种生物活性物质，为珍贵而稀有的生物药材。介绍了蛹虫草人工代料栽培技术，包括菌种制备、培养基原料配制、拌料、装瓶、灭菌、接种、菌丝培养、出草管理、采收等内容，旨在为蛹虫草菌种制备和生产提供参考依据。 　　关键词 蛹虫草；人工代料；栽培技术 　　中图分类号 S567.35.04+.7 文献标识码 B 文章编号 1007-5739（2016）13-0114-02 　　蛹虫草（又称北冬虫夏草、北虫草、黄金草），作为一种药用真菌，其药效成分和营养成分与冬虫夏草完全相同，属于世间珍贵而稀有的生物药材[1-2]。蛹虫草含有虫草素、虫草酸、虫草多糖、超氧化物歧化酶SOD和微量元素硒等多种生物活性物质，具有特殊的药用价值和滋补功效[3-4]。蛹虫草作为冬虫夏草的替代品，目前已广泛用于制药，深受消费者的青睐。人工代料培育蛹虫草不仅占地少，栽培周期短，而且经济效益好，是农村农民、下岗和退休职工兴业致富的好项目，也为我国名贵药材产业化生产又开辟了一个新的途径。 　　1 菌种制备 　　优质菌种是种植成功和高效的关键，蛹虫草菌种不可长期保存或多次转管扩繁，否则菌种容易退化变异，产量和品质会明显下降。因此，需要经常留种和更新菌种。 　　制种方法是采取组织分离法。选择适应性强、发菌快、见光转色快、性状稳定、速生高产的菌株进行组织分离制种，也可直接购买斜面培养基试管母种自行进行扩繁。目前有固体菌种和液体菌种2种类型，其中以液体菌种接种为好[5]。 　　1.1 液体配制 　　液体配比为葡萄糖20 g、蛋白胨10 g、磷酸二氢钾3 g、硫酸镁1 g、维生素B1 1片（10 mg）、水1 000 mL（pH值6～7）。先将1 000 mL水加热增温（约40 ℃），倒入蛋白胨搅拌溶解，再倒入其余原料，充分搅拌；然后用pH试纸测试酸碱度（标准pH值是6～7），若偏酸则用氢氧化钠调和，偏碱则用白醋或盐酸调节。 　　营养液配制的多少应根据生产量灵活掌握。实践证明，使用吸液管喷洒接种，每个培养瓶喷洒菌种4～5 mL，每瓶液体菌种（指小型医用盐水瓶）可接种37～40瓶；也可用蒸馏水或高压灭菌水将液体菌种稀释2～3倍进行接种，可大大提高菌种使用率。 　　1.2 装瓶 　　选用500 mL的医用盐水瓶或250 mL小型医用盐水瓶作为液体菌种培养瓶（500 mL大瓶可分装300 mL培养液，250 mL小瓶装至1/2/以上）。装瓶时用玻璃漏斗，以免培养液粘附于瓶口、瓶颈或瓶壁上而招致杂菌感染。瓶口用聚丙烯薄膜或化学棉、脱脂棉棉球封塞严密。 　　1.3 高压灭菌 　　用手提式高压灭菌锅灭菌。将上述培养瓶整齐地摆放锅内，上面用干毛巾盖好瓶口，关紧锅盖。大火加热至110 ℃，压力表指针指向0.05时打开排气阀以便排出冷空气，待压力表回至0时关掉排气阀；然后大火加热，让其快速升温至125～126 ℃，压力表指针指向0.15时改用小火，维持1.25 h后停火，等压力表回到0位，冷却后打开锅盖，取瓶出锅。 　　1.4 放种 　　培养瓶完全冷却后方可下种，母种扩繁在接种箱进行无菌操作。先将接种用一切用品、工具和试管母种及培养瓶事先放入接种箱内进行消毒。操作人员从接种口把手伸入箱内，在消毒碗内点燃至少2袋起舞消毒剂，进行薰蒸消毒。随即用袖头把接种口堵塞严密，密闭30 min。 　　操作人员将手洗净，并用75%酒精擦洗1遍，通过袖头伸入接种箱。再用75%酒精把手连同手腕部位一并擦洗1遍，用皮筋把袖头在手腕部扎紧，严防杂菌进入箱内。点着酒精灯，把接种工具用75%酒精擦洗1遍再放在酒精灯上方燎烤消毒；拿起母种试管，用75%酒精擦洗管口周围，并在酒精灯火焰上方燎烤一下。打开母种试管，用接种工具将试管母种切割成0.5 mm×0.5 mm大小菌块，在靠近酒精灯的无菌区进行放种，每瓶放种2～3块。 　　1.5 液体菌种培养 　　为利于菌种繁殖和菌丝生长，应将放完种的培养瓶放置黑暗环境中，在摇床上进行振荡培养，可全天24 h不停振荡培养或间歇式每隔1 h左右振摇1次，每次30 min左右。经过8～12 d振荡培养，瓶中便有大量絮状、片状菌丝体和菌丝球充满整个培养瓶；若无摇床条件，可用手摇措施振动瓶液，每隔1～2 h摇动1次为好。注意不可将营养液打湿封膜或棉塞。 　　2 培养基原料配制 　　2.1 原料配方 　　实践表明，人工代料栽培还是选用大米（杂交米）作主料为最好，具有发菌均匀、出草快、产量高的特点。每瓶装大米30 g、黄豆粉（豆面）3 g、营养液50 mL；营养液配方为水1 000 mL（pH值6～7）、葡萄糖25 g、蛋白胨10 g、磷酸二氢钾1.5 g、硫酸镁1 g、柠檬酸铵1 g、维生素B1 2片。 　　2.