环境微生物学教学课件 13-2生长量测定方法.pptVIP

细菌生长（数量）测定方法 （一）直接计数法（测微生物总数） 借助显微镜观察测定 1.涂片染色法 2.计数器(血球计数板）测定法 3.比例计数法 比例——样品菌液与等体积的血液混合，观测二者比例 4．比浊计数法 浊——细菌悬浮液的浊度 （1）制标准曲线（OD~No） （2）测菌液浊度，查图表得出细菌数量 （二）间接计数法 (测定活菌数) 提问：前述方法中计数的不都是活菌，如何分辨菌死活？ 繁殖 提问：细菌繁殖的可见现象是什么？ 产生菌落（固体培养基培养）、菌液混浊（液体培养基培养） 计数原理：一个细菌可繁殖成一个菌落或一群细菌. 缺点：慢 分固体培养法和液体培养法 一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为宜。 2.稀释液体计数法 特点：液体培养、统计学查表计数 又称MPN法 （或最可能数法） Most Probable Number 例如测定SRB（硫酸盐还原菌，厌氧）的数量 提问：能用稀释平板法计数吗？为什么？ 一般不能，厌氧菌暴露在空气中不能生长（除非厌氧培养箱） (4)统计－查表－计算 根据不同稀释度变黑试管 ①统计出数量指标 三位数及其中最低稀释度 （取变黑的管数最多、稀释度又最低的生长管数，为第一位数字，后面两个稀释度的生长管数为后两位数） 提问：上例情况而言统计数量是几？ ②查表 表——MPN表 MPN三管法测