依据安培检测的小型化毛细管电泳对饲料和肉产品中的瘦肉精和沙丁胺醇进行快速检测.docVIP

依据安培检测的小型化毛细管电泳对饲料和肉产品中的瘦肉精和沙丁胺醇进行快速检测 安培检测的新型小型化的毛细管电泳的快速分离能力，已在检测真实样品中的瘦肉精和沙丁胺醇的过程中得到证实。诸如关于CE-AD的酸度和运行液的浓度，分离电压，应用的电势和注射时间等因素的影响已被证实和优化。在最佳条件下，分离电压为2kv，在90mmol/L的H3BO3-Na2B4O7（pH=7.4)运行液中，两种β-兴奋剂可以在60秒内得到基线分离，并且抗坏血酸和尿酸不会对其产生干扰。对于以上的化合物具有高度的线性响应，超过三个数量级，检测限范围从1.2到6.50mol/L（S/N=3）。这种方法可以成功地对采取相应的简单的提取过后的饲料和肉产品进行分析。 关键词：小型化的毛细管电泳检测，-兴奋剂，瘦肉精，沙丁胺醇 图1瘦肉精（R1 =Cl,R2=NH2,R3=Cl）和沙丁胺醇（R1 =CH2OH,R2=OH,R3=H）的分子结构 介绍 图1展示的合成β-兴奋剂瘦肉精和沙丁胺醇的分子结构，它们可以加速肌肉的的形成，阻止脂肪的形成和积累，结果增加了家禽和家畜的肌肉率。不幸的是，瘦肉精和沙丁胺醇都容易遗留在动物体内，这对人类健康产生潜在的危害。为了保证消费者的权益，许多国家和地区已经禁止畜牧业使用β-兴奋剂。依据美国食品及药物管理局和世界卫生组织的规定，动物体内的瘦肉精在其肉、肝脏、肾脏，脂肪和奶中的最大含量分别为0.2,0.6,0.6,0.2，0.05μg/kg。尽管对于-兴奋剂有严格的规定，一些关于瘦肉精的事件还是引起了社会的极大关注，并且这样的事件任然是由于检测的失败。因此，对-兴奋剂的快速有效分析至关重要。 到目前为止，气相色谱-质谱法，高效液相色谱法，免疫分析法都应用于检测。对比前面提及的方法，毛细管电泳有许多优点，例如需要的样品体积小，分析时间短，分离效率高等等。最近，传统的毛细管电泳已经应用于分析-兴奋剂，并且一些文章已经报道了。安培检测法对于传统毛细管电泳和微毛细管电泳都比较适用，因此许多化合物不需要衍生化就可以被检测出来。虽然安培检测法没有激光诱导荧光法灵敏，但是它更通用、经济、容易缩至微米范围。 这里介绍的工作的目的已经发展成一种实验室可建立的新型μCE-AD，用来检测饲料和肉产品中的瘦肉精和沙丁胺醇，它可靠、便宜、易于操作，不需要微加工。μCE-AD已经成功地应用于饲料和肉产品中的瘦肉精和沙丁胺醇的快速检测。 实验： 试剂与材料 所有的试剂为分析等级。瘦肉精、沙丁胺醇、抗坏血酸、尿酸都是从Sigma公司购买的。现存的瘦肉精、沙丁胺醇、抗坏血酸、尿酸的浓度分别为5×10-3、5×10-3、1×10-2、1×10-3mol/L。标准溶液和样品在使用之前用适当的缓冲溶液稀释到所需的的浓度。 仪器 实验室建立的CE-AD系统之前就已被建造和描述。一个为毛细管两端提供电压的30kV的高压直流电源。毛细管的进口接正电势，出口的检测器有效接地。分离过程是在一个长8.5cm的有机玻璃包裹的石英毛细管中进行。 一个直径300μm碳盘电极作为工作电极，在使用之前，圆盘表面要经过砂纸打磨，去离子水中声处理，然后小心地使用引导金属管让其对着毛细管的出口。 所有实验中的三电极体系是由碳盘工作电极、铂辅助电极、饱和甘汞电极辅助电极组成。这与BAS LC-4C 安培检测器联合起来使用。电泳图谱使用图形记录器记录的。 样品制备 四种饲料样品是从一个饲料供应者那获得的，肉产品（肉，肝脏，胃，心脏，肾脏）是从当地的超市买的。饲料和肉产品分别参照文献21,22进行处理。所有的的样品溶液在冰箱中4℃保存。 结果与讨论 小型CE-AD系统的最佳化 pH和缓冲溶液浓度的影响 分析物的分辨率和迁移时间已经在几个缓冲溶液中研究过了。实验中以硼酸缓冲液作为运行液，因为它可与分析物螯合形成可溶的复杂阴离子。在pH范围为7.4-8.0，瘦肉精和沙丁胺醇可以实现基线分离。抗坏血酸和尿酸对检测不会产生干扰。所有分析物的迁移时间会随着pH值的增大而增加（图2）。另一方面，在pH范围为6.6-7.2的硼砂-磷酸缓冲溶液中，瘦肉精和沙丁胺醇可以得到基线分离，但是会花费更长的时间，通常超过120秒。在pH为5.8-8.0的磷酸缓冲溶液中，瘦肉精和沙丁胺醇不能够有效地分离。因此，硼酸缓冲液用来作为运行液，pH 7.4作为实验的最佳pH值。 图2 运行液的pH对各分析物迁移时间的影响。工作条件：熔融成型的石英毛细管：25微米内径×8.5厘米。工作电极：直径300微米的碳盘电极；运行液：90mmol /L；分离电压：2kV；注