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- 2017-03-06 发布于河南
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分子生物学——从一个表达系统说起 DNA双螺旋模型的建立、密码子的发现和解读,使传统生物学上差异巨大的动物、植物和微生物在分子水平上统一在了一起。 这使生物学家有机会在一个物种中表达另一个物种的蛋白质。 现在,我们试图建立一个能表达外源基因的大肠杆菌表达系统…… 中心法则 我们需要宿主和载体 载体(vector) 为什么需要一个载体? 我们需要一个能在宿主内存活的载体。 质粒(plasmid) 质粒:是染色体外能够自主复制的较小的DNA分子。 大部分的质粒虽然都是环状构形,然而目前也发现有少数的质粒属于线性构形,它存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,乃至于植物的线粒体等胞器中。 质粒为什么能够自主复制?因为质粒上有复制起始位点,是一个“复制子(replicon)”。 质粒在细胞内的复制一般有两种类型:紧密控制型(Stringent control)和松弛控制型(Relaxed control)。 现在需要一个位点用于插入外源基因片段——即多克隆位点(multiple cloning site, MCS)。 MCS是包含多个限制性酶切位点(restriction site)的一段很短的DNA序列。 把要表达的外源基因连接到质粒上…… 这样可以吗? 不行,我们需要启动子和终止子。启动子(promotor)是一段能被RNA聚合酶所识别的序列。 如何让m
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