第六章DNA损伤与修复.doc.doc

中南大学课科目: 授课内容: DNA损伤与修复授课对象：临床医学年制年制授课时数：学时授课： 授课地点：授课时间：DNA损伤与修复主要的DNA修复方式：切除修复、重组修复和SOS修复DNA结构受损伤的因素损伤的类型及其效应DNA损伤修复DNA主要修复方式多媒体教学多媒体课件多媒体DNA损伤DNA损伤在紫外线照射对DNA分子的损伤中最常见形成的二聚体是T-T）；电离辐射、烷化剂、碱基类似物、修饰剂、DNA自发性损伤及其它因素 1. DNA自发性损伤及其它因素 （一）DNA复制产生误差　以DNA为模板按碱基配对进行DNA复制是一个严格而精确的事件，但也不是完全不发生错误的。复制误差主要由互变异构引起，因为某些错配的核苷酸避开了校正系统的检测。复制过程中如有错误的核苷酸掺入，DNA聚合酶会暂停催化作用，以其3ˊ→5ˊ外切核酸酶的活性切除错误接上的核苷酸，然后再继续正确的复制，这种校正作用广泛存在于原核和真核细胞的DNA聚合酶中，是对DNA复制误差的修复形式，从而保证了复制的准确性。但校正后的错配率仍约在10－10左右，即每复制1010个核苷酸大概会有一个碱基的错误掺入。 （二）DNA的自发性化学变化　生物体内DNA分子可以由于各种原因发生变化，至少有以下类型： ①碱基的异构互变　DNA分子中的4种碱基各自的异构体间都可以自发地相互变化（例如烯醇式与酮式碱基间的互变），使碱基配对间的氢键改变，使腺嘌呤配上胞嘧啶、胸腺嘧啶配上鸟嘌呤等，如果这些错配发生在DNA复制时，就会造成子代DNA序列与亲代DNA不同的错误性损伤。 ②碱基的脱氨基作用　碱基的环外氨基有时会自发脱落，从而胞嘧啶会变成尿嘧啶、腺嘌呤会变成次黄嘌呤（H）、鸟嘌呤会变成黄嘌呤（X）等，遇到复制时，U与A配对、H和X都与C配对就会导致子代DNA序列的错误变化。 ③脱嘌呤与脱嘧啶　自发的水解可使嘌呤或嘧啶从DNA链的核糖磷酸骨架上脱落下来。在哺乳动物细胞基因组中，每天每个细胞因N-糖苷键自发水解约丢失10 000个嘌呤碱基和200个嘧啶碱基。 ④碱基修饰与链断裂　细胞在正常生理活动中产生的O2、H2O2等活性氧族会造成DNA损伤，产生胸腺嘧啶乙二醇、羟甲基尿嘧啶等碱基修饰物，还可引起DNA单链断裂等损伤。每个哺乳类细胞每天DNA单链断裂发生的频率约为5万次。此外，体内还可以发生DNA的甲基化、结构改变等，这些损伤的积累可能导致细胞老化或者癌变。如果细胞不具备高效率的修复系统，生物的突变率将大大提高。 2.电离辐射损伤: ①电离辐射损伤DNA有直接和间接的效应，直接效应是DNA直接吸收射线能量而遭损伤，间接效应是指DNA周围其它分子（主要是水分子）吸收射线能量，而产生具有很高反应活性的自由基进而损伤DNA。 电离辐射对DNA损伤的机制主要有： （1）自由基损害。 （2）损伤DNA修复系统。 （3）MCI 假说（mobile charge interaction），即电磁场除了间接通过自由基或DNA修复系统作用于DNA分子外，还能够直接与DNA分子链发生作用，作用的靶点是DNA分子中移动的电子。 ②电离辐射可导致DNA分子的多种变化： （1）碱基变化　主要是由OH.自由基引起，包括DNA链上的碱基氧化修饰、过氧化物的形成、碱基环的破坏和脱落，一般嘧啶比嘌呤更敏感。 （2）脱氧核糖变化　脱氧核糖上的每个碳原子和羟基上的氢都能与OH。反应，导致脱氧核糖分解，最后引起DNA链断裂。 （3）DNA链断裂　这是电离辐射引起的严重损伤事件，断链数随照射剂量而增加。射线的直接和间接作用都可能使脱氧核糖破坏或磷酸二酯键断开而致DNA链断裂。DNA双链中一条链断裂称单链断裂（single- strand broken），DNA双链在同一处或相近处断裂称为双链断裂（double-strand broken）。虽然单链断裂发生频率为双链断裂的10-20倍，但还比较容易修复；对单倍体细胞来说（如细菌）一次双链断裂就是致死事件。 （4）交联　包括DNA链交联和DNA-蛋白质交联。同一条DNA链上或两条DNA链上的碱基间可以共价键结合，DNA与蛋白质之间也会以共价键相连，组蛋白、染色质中的非组蛋白、调控蛋白、与复制和转录有关的酶都会与DNA共价键连接。 3. DNA损伤 DNA损伤DNA链断裂、引起DNA的交联, DNA与蛋白质的交联。 4.DNA损伤的概念与DNA突变概念的区别 某些物理化学因子，如紫外线、电离辐射和化学诱变剂等，可以引起生物突变或致死的作用，造成DNA结构和功能的破坏称DNA损伤。 突变（mutation）：指一种遗传状态，可以通过复制而遗传DNA结构的任 何永久性改变。携带突变基因的生物称为突变体，未突变的称为野生型。