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中药饲料添加剂调控仔猪肠道微生态平衡研究进展 孔祥峰，印遇龙 中国科学院亚热带农业生态研究所 畜禽健康养殖研究中心 2010.10.17 报告提纲 中药饲料添加剂介绍 肠道菌群的功能 肠道菌群发育规律 中草药功效与肠道菌群 肠道菌群的中草药饲料添加剂调控 中药饲料添加剂介绍 概念：中药饲料添加剂，顾名思义就是以中药为原料制成的饲料添加剂。 分类：从营养角度可将饲料添加剂分为营养性和非营养性饲料添加剂两大类。由于中药含有多种有效成分，兼有营养和药用功能，基本具备饲料添加剂的所有作用，可作为一类独立的饲料添加剂。 特性：中药多为复杂的有机物，其组成成分均在数十种，甚至达到上百种，按照“构效关系”理论（即一种成分可产生一种作用）来说，中药具有“多能性” 。 中药饲料添加剂的分类 鉴于中药饲料添加剂的特殊性，目前尚无统一的分类标准。一般按照药材来源、原料类型、产品作用、组方和剂型进行分类。 按药材来源：分为植物类（山楂、黄芪等）、动物类（鸡内金、地龙等）、矿物类（麦饭石等）和化合物类。 按原料类型：分为原产物、加工提取物（刺五加提取物、黄芪多糖等）和副产物（党参茎叶、人参渣、沙棘果渣等）。 按照剂型：分为常规散剂、复方提取物粉剂和颗粒剂、超微粉等剂型。目前常用的中药饲料添加剂是常规散剂。 中药饲料添加剂的分类 按照组方：分为单味中药提取物、单味中药、复方中药和中西药结合饲料添加剂。目前一般使用的是复方中药添加剂，即在中兽医理论指导下，依据君臣佐使的法则遣方用药，以发挥其群药的综合作用。 按产品作用：分为防病保健(增强免疫、抗菌驱虫、健胃消食、养血滋阴、清热解毒、安神行气)、增加生产性能(主要用于促生长、促生殖、提高肉、蛋、奶及经济动物产品产量)、提高产品质量(如用姜黄素改善鸡蛋品质，用红辣椒、万寿菊等改善肉鸡的肉品质 )和改善饲料品质(如用大蒜素刺激动物食欲、延长饲料贮存期 )等四类。 生物拮抗 免疫功能 营养功能 胃 肠 道 菌 群 有 益 作 用 维生素的合成与代谢 蛋白质合成与氮代谢 多糖和粗纤维分解代谢 脂类的分解代谢 胃肠道菌群的功能 胃肠道菌群 的有害作用 B E C D A 增加免疫成本 竞争营养物质 产生有害氨基酸代谢物 改变肠道的结构与功能 降低脂肪的消化率 胃肠道菌群的功能 实验动物：1、7、14、21和28日龄的哺乳仔猪各6头。 样品采集：取空肠、回肠、盲肠和结肠内容物，提细菌DNA。 试验方法与测定指标：PCR-DGGE技术比较肠道菌群的结构和多样性，Real-time PCR方法定量肠道优势菌群 。 哺乳仔猪肠道菌群发育规律研究 细菌 引物 序列 产物大小 乳酸杆菌 Lab-0159 Univ-0515 5’- AAGATGCAGCTCTTGTGTTG-3’ 5’- ATCGTATTACCGCGGCTGCTGGCA-3’ 356 bp 双歧杆菌 Bif-xfp-2294-f Bif-xfp-2691-r 5’- ACCAAGGTCAACCTCCTCTCTG-3’ 5’- TGCCCAGATTCAGCAAAGTCC-3’ 397 bp 肠杆菌 F-ent R-ent 5’- ATGGCTGTCGTCAGCTCGT-3’ 5’- CCTACTTCTTTTGCAACCCACTC-3’ 300 bp 链球菌 16S-195 16S-489 5’- CAGTATTTACCGCATGGTAGATAT-3’ 5’- GTAAGATACCGTCAAGTGAGAA-3’ 294 bp 试验结果 随日龄增加，肠道菌群结构变得复杂多样，且肠道后段菌群多样性高于肠道前段； 每一仔猪个体都有自己独特的肠道微生物组成，日龄越小，不同个体间菌群差异越小。 盲肠微生物DGGE图谱 结肠微生物DGGE图谱 回肠微生物DGGE图谱 试验结果 1～7日龄仔猪胃肠道内乳酸菌、链球菌和肠杆菌占细菌总数的比例较高，出生1周后乳酸杆菌丰度降低，双歧杆菌等厌氧菌开始成为肠道优势菌，14天后空肠和回肠链球菌丰度增加。 运用基于16SrDNA克隆文库技术构建了3个克隆文库并测序分析，共得到536条非嵌合的16SrDNA全长序列。根据99%的序列相似性划分为157个进化型，其中主要的优势菌群在系统发育地位上基本属于乳酸杆菌属、链球菌属、罗氏菌属、梭菌属和葡萄球菌属。其中21和28日龄哺乳仔猪以及21日龄断奶后1周仔猪分别测序了171、194和171个克隆，各自划分为40、61和56个OTUs。 哺乳和断奶仔猪回肠微生物发育树 哺乳仔猪 断奶仔猪 断奶对仔猪胃肠道菌群发育规律的影响 发现断奶应激使仔猪肠道链球菌属增加23%，乳酸杆菌属降低36%，肠道菌群失调是引起腹泻的主要原因。 88% 52% 3