人体X-性染色质的观察.ppt

实验四、人体X-性染色质的观察 一、实验目的 1、通过实验初步掌握观察与鉴别X-染色质的简易方法，识别其形态特征及所在部位。 2、为进一步研究人的染色体畸变与疾病（性别异常）、鉴别胎儿性别（羊水细胞涂片）提供参考条件。 二、实验原理 1、性染色体：和性别决定有明显的 直接关系的染色体。 2、性染色质发现： 1949年Barr等发现，在雌猫的神经细胞核内有一个凝缩的深染小体，在雄性的细胞中没有。 3、X-性染色质形成： 进一步了解到，雌体细胞中的两条X-染色体在间期时有一条处于凝集而不活跃的状态（异固缩状态），形成明显的染色中心，染色中心这就叫X-性染色质、 又叫Barr小体。 4、适用于所有哺乳类： 进一步研究发现所有的哺乳类都是如此。雌性细胞中都有一个Barr小体。 5、 Barr小体的数目： 正常雌体XX—1个 正常雄体XY—0个 雌体XXX —2个 雄体XXY—2个 雌体、雄体细胞中无论有几条X染色体在间期细胞内除一条不失活外，其余都将形成X-染色质。 巴氏小体的数目＝ X染色体的数目－１ 6、Barr小体大小、形态、位置： X-染色质的形态表现为一结构致密的浓染小体，轮廓清楚。 大小约1μm左右。 常附着于核膜边缘或靠近内侧。 形状有微凸形（馒头形）、 三角形、卵形、短棒形（长方形）、圆球形等。 7、鼓槌状突出物 在血液的多形核白细胞分裂形成过程中，裂出形成有一细缝连结的鼓槌状突出物（ Barr小体）。 8、性别异常 正常女性口腔粘膜细胞中约有30-50%的Barr小体。 男性中偶尔可见不典型者。大于3%即性别异常。 Y小体： 用荧光染料如盐酸阿的平、QH染色后，可在间期核中看到一个直径约0.3微米的强荧光小体，即 Y小体 或在中期核中看到Y染色体的长臂发出强荧光。 三、实验步骤 1、取上皮粘膜细胞：用牙签从口 腔两侧颊部刮取上皮粘膜细胞，原位 括2-3次（弃去第一次刮取的死细胞）， 分别涂抹在干净载玻片上，范围 1- 2张盖片大小。 2、染色：干后，用5%Giemsa （改良苯酚品红）染色10min ，勿干。 3、压片加盖玻片复以吸水纸，用 手指轻度加压。 4、镜检 选取典型细胞的原则 1、核质呈网状细颗粒状分布； 2、核膜清晰，核膜无破损； 3、染色适度； 4、周围无杂菌。 四、作业 绘制口腔粘膜细胞图，示X-染色质的形状和部位。 * *