147三氮杂冠醚羟基胍基衍生物的合成及与DNA的相互作用.pdfVIP

1,4，7．三氮杂冠醚羟基胍基衍生物的合成及与 DNA的相互作用 盛欣张晶晶邵莺李英刘芳陆国元+ (南京大学化学系配位化学国家重点实验室南京210093) 摘要： 氮杂冠醚羟基胍基衍生物是有效的DNA切割试剂。 关键词： 三氮杂冠醚胍基DNA切割 人工合成核酸切割试剂在化学、生物学和医药等领域中具有重要的意义和应前景。对于DNA， 虽然现在已经发展了许多人工切割试剂，但它们绝大多数都是通过自由基机理切割的．金属配合物 作为核酸酶的模拟物有较高的切割效率，但其存在不稳定和细胞毒性大的缺点。而有机小分子切割 试剂则可以克服这些缺点。因此我们设计了1，4，7一三氮杂冠醚的羟基胍基衍生物来作为人工核酸酶水 NMR、13CNMR 然后肼解、胍基化得1,4，7一三氮杂冠醚羟基胍基衍生物4。化合物2、3、4均经过1H 和ES．MS鉴定。 f《飞 坚 Ho／＼√U CH2c12 绍 H。‘科爻～粤H。jkN掣∥ Ho～UVNH2叫FHo～NJ。沙心p。 我们研究了化合物4与pUC．19 于温度为37℃下反应20h。反应结束后，用琼脂糖凝胶电泳分析所有反应液。凝胶电泳结果(图1) 表明， 随着4浓度的增加， circularnickedDNA(Form I)切割成circularnickedDNA(Form pmol／L时，可将90％以上的超螺旋DNA(Form II)。这说明 全切割(图2)。 E-mail：!丛gY女a娶@画坠：§照坠：￡壁 国家自然科学基金资助项目。 13 和pUC．19 ℃的水浴下反应14h，电泳结果见图3。由图可见切割反应几乎没有受到影响，说明4对DNA的切 割反应并非通过羟基自由基途径。为排除分子氧的影响，我们在手套箱中进行了严格的无氧操作，4 仍能有效地切割DNA。以上的实验结果表明4切割DNA主要是水解途径。 图2化合物4的浓度对DNA裂解的影 Lane1．DNA control；Lane 3．DNA+4(90I，tmol／L)； 2．DNA+4(45pmol／L)；Lane Lane 5．DNA+4(180I．tmol／L)；Lane6．DNA+4(270Iunol／L) 4．DNA+4(135pmol／L)；Lane ∞ 5} ∞ 加 ∞ ∞ ∞ —琴】(=叫ok孑f、Ja ∞ ∞ 仲 0 50 1∞ 150 200 250