60Co照射灭活方法对鸡大肠杆菌菌体抗原的应用.pdfVIP

禽类传染病 整合子最为常见，普遍存在于肠杆菌科细菌中。本实验中19株鸡源致病性沙门氏菌有84．21 ％携带I类整合子，比文献报道的59％～75％检出率高IIJ。通过本实验的结果分析发现，I 类整合子的存在与否影响着临床分离沙门氏菌多重耐药率的高低，I类整合子阳性菌株的多 重耐药率为87．5％。整合子携带的耐药基因与耐药表型之间没有相关性，但是整合子在多重 耐药菌中的出现却比较集中，本实验中I类整合子集中在7~10耐的菌株中，说明整合子与 多重耐药之间有密切的联系。 本实验中在两株菌中检测出了intll和3’保守端的基因，但在用设计的检测扩增可变区 的引物扩增时，结果却为阴性。可能这两株中并未携带基因盒的缘故，一旦在适当的条件和 抗生素的选择压力’F，就可以整合耐药基因，表现出耐药性。从可变区扩增结果图可以看出， 所测菌株携带基因盒片段长度在1000bp～2000bp之间不等。 在本实验中以intll基因的扩增作为第一类整合-rⅢ性菌株的初筛选。以往的文献报道 以设计两端保守区的引物来扩增可变区，以此结果作为整合子瞰1性菌株的检出方法pJ，从本 试验扩增的结果可以说明这种检测方法不利于1F典型I类整合予的研究。目前整合予的类型 都是根据整合酶基因的类型来划分的，有学者认为在火量未知整合酶基因序列确定之前，以 0|。本研究中可变区的阳性检出 扩增intll的结果作为整合子阳性菌株的检出方式较为合理【l 菌株与intll基因阳性检出菌株比率为87．5％(14／16)，且在对艇合子进行分类时是按照intI 基冈来进行分类的，所以本文作者认为将intI基因检出的结果作为整合子阳性菌株的初筛检 出方式是可信的。 细菌对抗生素的耐药性愈米愈严重，而且多重耐药现象也越来越多，已经严重威胁着人 和动物的健康。整合子系统理论为研究细菌的耐药机制展示了一个新的方向，整合子通过整 合作用，抗性基因之间可以相互交换，再借助质粒的转化、转导和结合作用，使得耐药性在 生物间广‘泛传播，给生产生活带来严重危害。细菌耐药是一个很复杂的过程，作用机制也很 多，整合子对多重耐药的影响只是其中的～个方面，应对籀合子一基因盒系统结构功能，以 及如何控制做进一步研究。 参考文献略 60Co照射灭活方法对鸡大肠杆菌菌体抗原的应用 胥桂华 舒秀伟 (辽宁益康生物制品有限公司 辽宁辽阳 111000) 摘要：本试验用辐射灭菌的方法之一--60Co照射对鸡E．coli菌体(O)抗原进行灭活，并加入中草药蜂胶 佐剂制备灭活苗，将此疫苗进行各项检测合格后，免疫接种鸡雏，同时用甲醛灭活的灭活苗作为对照，2 周后，用同源强毒茵攻击。检测结果表明：经60Co照射制备的鸡E．coli灭活疫苗安全、可靠，该疫苗对鸡 的免疫保护率明显高于甲醛灭活苗。 关键词：60Co照射免疫保护率大肠杆菌 灭活疫苗的传统灭活方法灭活，包括甲醛(应用最早和最广泛)或B丙内酯、乙基乙烯 亚胺(EEl)、乙酰乙烯亚胺(AEI)和二乙烯亚胺(BEI)等灭活剂灭活，上述方法易使病 毒表面融合蛋白抗原受到破坏，同时也发现，这些灭活剂有较强的致癌作用，并且，灭活剂 残留现象不容易控制，造成严重的副反应，应用于动物机体后，影响动物体的健康。因此， 灭活茸逐渐被弱毒疫苗所代替，然而，弱毒疫苗的缺点是：弱毒(活)疫苗株的毒力不稳定， 通过突变或与野生毒力株发生重组，在接触易感动物或与细胞后发生毒力回升(返祖)现象， 则在接种疫苗后，可能使被接种的动物感染发病，引起疫病流行【l】。所以，灭活苗的研制 重新被人们所重视。而灭活方法的选择尤为重要。 60Co照射灭活的机理：由于微生物水的含量占90％以上，当射线照射后，水瞬间被激 470 第六届理事会第二次会议■教学专业委员会2006年会议论文集 发和电离而分解成氢离子、氢氧根离子和OH一、H+自由基，过氧化物和自由基具有破坏 微生物核酸、酶或蛋白质的能力，因而能致死微生物。另外，也认为微生物存在一个靶位， 这就是遗传信息DNA，微生物被射线照射时，由于靶吸收了大能量——j‘击中”。微生物被 杀灭【2】。当鸡E．coil抗原的遗传信息DNA被射线照射时，吸收了大能量而击中，从而使 E．coli失去了感染性，而免疫原性却仍能继续保持。是一种物理学与生物学相互渗透应用领 域里的一种新型灭活方法。 l材料与方法 1．1