Ah受体效应和雌激素受体效应在城市生活污水处理工艺过程中的行为研究.pdfVIP

第三届环境模{fI与污染控制学术研讨会论文 Ah受体效应和雌激素受体效应在城市生活污水处理工艺过程中的行 为研究 王伟”，胡建英1h，冯磊”，王乐征”，顾炜曼”，蒋以元卦，杨敏乱，周军3、(¨t京大学 环境学院，；2．中科院生态环境研究中心：3北京城市捧水集团有限公司) 1．前言 研究已经证实了环境中内分泌干扰物质和人类健康及野生生物异常之间的因果关系1。。研究证 明许多内分泌干扰物受雌激素受体调节，但也有一些环境污染物，比如二恶英类物质通过芳香烃受 AhR)表现出内分泌干扰作用”。 hydmcarbon 体(aryl receptoL 对于城市生活污水处理厂的各个工艺流程以及出水的内分泌干扰作用已经有了一些研究， 水中含有雌激素类物质”，Ⅺrk等还发现了生活污水具有雄激索效应”，研究主要集中于对通过雌 激素受体起作用的物质，对于生活污水的Ah受体效应的报道较少。本实验运用重组受体，报告基吲 表达酵母法测定生活污水不同工艺流程出永的雌激素受体效应的同时，测定了Ah受体效应。 2．研究方法 2．．1生活污水水样前处理方法 表．1各水样具体采集地点 实验对象是北方某城水废水厂，具体采样点虹表．1所示。取2L f标记 采样点 l 水样用盐酸将pH调到3．再用玻璃纤维滤膜过滤(GF从， 70mm．wha廿rIan)。然后将水样通过用10mI=氯甲烷，10ml甲醇，}撑1 总进水口 I抖3 【0 mvmin。用 沉淀池出水 ml纯净水活化过的c18固相萃取柱．上样速度为10 }舭 加氯消毒 氨气魄干C18固相萃取柱后，用有机溶剂洗脱，并将样品分成非极 l拌5 砂虑池出水 性馏分(F1)．中极性馏分(F2)，和极性馏分(F3)三个馏分。各馏分用氮 气吹干后DMsO定容到100ul供毒性试验使用。 l拌6 臭氧消毒出水 2．2Ab受体效应测试方法 J掣7 生物活性发出水 本实验用妇cc^Ⅱ，口mw船cB理v括l口P酵母菌株测定Ah受体效应。菌株 激活受体基因，同时激活报告基因。转录成口一半乳糖苷酶，通过测定p一半乳藉苷酶来检测出化学 物质的Ah受体效应。实验具体方法基本和Miller等人的酵母测试方法”一致，并做了一些改进“。 2．3雌激素受体效应 测定雌激素受体效应方法的原理是配体进入酵母如cc^d，口∞，c“cPMv函缸P细胞核后与雌激素受体的 配体结合域以及辅助激活因子结合，使得雌激素的配体结合域核与辅助激活因子相连的雌激素基因 激活域在空间上靠近，形成一个完整的转录撤活因子，激活报告基因口一半乳糖昔酶的转录，通过 测定口一半乳耱苷酶活性来评价物质的雌激素受体效应。实验所使用的是克隆有人类雌激素受体 (hERQ)的基因酵母菌株Y190。 3．结果和讨论 33000 3．IAh受体效应 2SD∞ 极性馏分没有表现出Ah受体效应，非极性馏分和中 2姗 极性馏分均表现出了明显的Ah受体效应，其中中极 ：I∞。0 性馏分表现出更强的Ah受体效应。结果如图．1和图．2 一13000 所示。从图一1可知，进水(#1)的非极性馏分的Ah