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外文文献及翻译 题目: 利用固定化过氧化氢酶 回收纺织品漂染的废水 专 业 食品科学与工程 学 生 姓 名 梁金龙 班 级 B食品072 学 号 0710308119 指 导 教 师 郑 清 利用固定化过氧化氢酶回收纺织品漂染的废水 Silgia A. Costa1, Tzanko Tzanov1, Filipa Carneiro1, Georg M. Gübitz2 Artur Cavaco-Paulo1, 1纺织工程系, 米尼奥大学, 4810吉马尔, 葡萄牙 2环境生物技术系, 格拉茨技术大学, 8010格拉茨, 奥地利 作者联系方式 (Fax: +351 253 510293; E-mail: artur@det.uminho.pt) 关键词:过氧化氢酶的固定化,酶稳定,过氧化氢,纺织印染 摘要 过氧化氢酶固定在氧化铝载体上并用戊二醛交联,在再循环塔反应器和CSTR反应器中研究贮存稳定性,温度和pH值对酶的活性。固定化酶的在的活性维持在44%,pH值11(30?C),对照组是活性为90%,pH值7(80?C),过氧化氢酶固定化的半衰期时间被提高到2小时(pH12,60?C)。用过氧化氢漂白织物后,洗涤过程中的残留水被固定化酶处理,可以用于再次印染时,记录实验数据。 序言 由于新的法规的出台,从生态经济的角度来看(Dickinson1984年),对于纺织行业中存在的成本和剩余水域的污染问题,必须给予更多的关注。过氧化氢是一种漂白剂,广泛应用于工业纺织工艺(Spiro Griffith1997年)。在去除H2O2时,会消耗大量的水和能源(Weck 1991, St?hr Petry 1995),以避免对氧气敏感的染料(Jensen 2000)产生后续问题。过氧化氢酶可用于降低过氧化氢的含量(Vasudevan Thakur 1994, Emerson et al. 1996),从而减少水分消耗或方便回收印染洗涤液。过氧化氢酶的使用主要问题出在漂白时温度和清洗液碱度过高。以前,我们试图通过筛选新的嗜热嗜碱的微生物(Paar et al. 2001)或使用不同的酶稳定剂(Costa et al. 2001)来解决此问题。但是染料与蛋白质之间的潜在相互作用(Tzanov et al. 2001a, b)表明,可溶性过氧化氢酶的使用是不恰当的。固定化过氧化氢酶的使用还有一种选择(Costa et al. 2001, Amar et al. 2000)。在这项研究中,我们对氧化铝进行共价固定并使用戊二醛作为交联剂,这种方法在商业中得到验证。本项研究的目的就是探讨过氧化氢酶的固定化动力学,及其稳定性和工艺条件,这将使我们能够应用此系统,以处理可能被用于清洗染色的反复使用的酒。 材料和方法 酶 Terminox(EC1.11.1.6),50L以上,由AQUITEX- Maia提供,葡萄牙产。 过氧化氢酶的固定化 取Al2O3颗粒或薄片(Aldrich),直径分别为3和7毫米,在45摄氏度下,先经浓度4%的γ-氨丙基三乙氧基硅烷(Sigma)烷基化,再放入丙酮中浸泡24小时。用蒸馏水洗涤硅烷化载体后,放入浓度为2%戊二醛水溶液中室温下浸泡2小时(Aldrich),重复清洗一次并在60?C下干燥1小时。取五克的烷基化载体,室温24?C下浸泡在25毫升粗酶制剂中(Costa et al. 2001)。得出,每克Al2O3颗粒中含固定化蛋白质的量为18mg,每克Al2O3薄片中含固定化蛋白质的量为14mg。 游离酶和固定化酶的活性测定 游离的过氧化氢酶的活性测定方法是,将26mmol/L的过氧化氢与50mmol/L钾磷酸盐缓冲液在pH 7、30?C下反应降解,然后用分光光度法在240nm处测吸光度。其活性的是利用过氧化氢的摩尔吸光系数(39.4 mol/L cm)(Aebi 1974)测定的。固定化酶在恒温反应器中恒温,循环速率1mlmin-1,后在pH 7、30?C下用一个批处理CSTR反应器与过氧化氢反应,调节浓度浓度从0.015mol/L增加至2mol/L,该反应器装有固定化过氧化氢酶5克(Costa et al. 2001),酶和底物作用后通过反应柱。剩余的过氧化氢测定用高锰酸钾滴定法和测试盒法。过氧化氢酶的活性从1nμmolmin-1mg-1结合蛋白中测定。 蛋白检测 酶被固定化后,上清溶液中的蛋白含量可用Bradford法测定。结合蛋白被的含量可以作为起始和残余蛋白浓度差异的度量。 漂白后的洗液 实验所用的残留水水是从一纺织公司(

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