H1N1流感病毒在微载体培养MDCK细胞上增殖的研究.pdfVIP

· 12 · 微生物学免疫学进展 2013年第41卷第 1期 ProginMicrobiolImmunolFeb．2013，V01．41，No．1 · 论 著 · H1N1流感病毒在微载体培养MDCK细胞 上增殖的研究 刘鹏，李佳林，马超，赵祖波 (兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心，兰州 730046) 摘要：目的 探索 MDCK细胞在微载体上的培养条件，并研究H1N1型流感病毒在 MDCK细胞上的增殖条件。 方法 在微载体上培养好MDCK细胞上用H1N1型流感病毒在不同的病毒感染复数(MOI)、胰酶浓度两个关键的 病毒增殖条件进行流感病毒在细胞上的增殖研究。结果 微载体质量浓度为6g／L时，MDCK细胞培养密度可以 达到4．5x10cells／mL。在MOI为0．05接种流感病毒，胰酶质量浓度4 g／mL，流感病毒在MDCK细胞上可获得较 高的滴度。结论 MDCK细胞用微载体培养可以达到较高的细胞密度，可以作为规模化生产新型流感病毒疫苗的 主要细胞基质进行进一步的研究。 关键词：HIN1流感病毒；犬肾传代细胞；微载体；病毒感染复数；浓度 中图分类号：R373．13 文献标志码：A 文章编号：1005—5673(2013)01—0012—04 Research onmultiplicationoftheH1N1subtypeinfluenzavirusin large-scalemicro-carrier-basedMDCK cellculturesystem LIUPeng。LIJia—lin，MAChao，ZHA0Zu—bo (LanzhouInstituteofBiologicalProductsCo．，Ltd．，CenterforGansuProvincialVaccineEngineeringResearch。 Laazhou730046，China) Abstract：Objective ToinvestigatethegrowthkineticsofinfluenzavirussubtypeH1N1inmammaliancel1．．basedmicro．． carrierculturesystem。andthenoptimizecultural conditions．Methods OnthebasisofdiversityofMOIandTPCK．tryp— sinconcentrationandmicro—carrierconcentration，MDCK ceHsculturedinmicro—carderwasinfectedbyinfluenzaviurs． ThedensityofMDCKceHsandHAconcenrtationweredetected．Results Atof0．05MOIand4 g／mLofTPCK—trypsin concenrtation。MDCK celldensitywas4．5×10。cells／mLandHAconcenrtationwashigherwitlltheconcentrationofmicro— carrier6g／L．Conclusion TheresultsdemonstratedthattheinfluenzaviursH1N1subtypecouldbergowninlarge·scale mammaliancell-·basedmicro-c·arrierculturesystem withhigh-·yieldvirusandevidenced thefeasibilityofmammaliancell-- basedmicro—carrierculturesystem forinfluenzavaccine． Keywords：H1