HPLC法测定正糖胶囊中甘草酸的含量.pdfVIP

HPLC 法测定正糖胶囊中甘草酸的含量 翟宏宇 吉林省药品检验所 长春 130062 摘要 目的 建立测定正糖胶囊中甘草酸含量的方法 方法 采用反相高效液相色谱法测 定正糖胶囊中甘草酸的含量, 色谱条件 BDS 柱 250X4.6mm,5u ;流动相 甲醇 0.2M 醋酸 铵溶液 冰醋酸 670 330 10 检测波长 250nm 结果 甘草酸铵进样量在 0.086~1.075ug 范围内与峰面积呈良好的线性关系 相关系数为 1.0000 平均回收率为 99.8 % 结论 方法简单 精密度好 结果准确 可作为该制剂质量控制标准 关键词 HPLC 甘草酸 含量测定 正糖胶囊是由党参 甘草 玉竹等十余味中药所组成的中药复方制剂 临床上用于糖尿病 的治疗 为了控制其质量 我们采用 HPLC 法对本制剂中甘草酸的含量进行测定 1 仪器与试药 仪器 LC 10ATvp 高效液相色谱仪 日本岛津 色谱工作站 大连化学物理研究所色谱 中心 甲醇为优级纯 水为超纯水 甘草酸铵对照品购于 Sigma 公司 含量为 75% 精制后纯 度 98% 其它均为分析纯 2 色谱条件 采用 Hypersil BDS-C18 柱 250x4.6mm 5u ;流动相 甲醇 0.2M 醋酸铵溶液 冰醋酸 670 330 10 检测波长 250nm;流速 0.9ml/min.柱温 32 灵敏度 0.001AUFS 进样 量 10ul, 理论板数按甘草酸峰计算应不低于 2000 3 实验方法 3. 1 对照品溶液的制备 精密称取甘草酸铵对照品适量 加甲醇制成每 1ml 含甘草酸 铵 0.86mg 的溶液 即得 1g 甘草酸铵折合甘草酸 0.9795g 3 . 2 供试品溶液的制备 取正糖胶囊内容物约 0.5 克 精密称定 置 50ml 量瓶中 加入流动相约 45ml,超声提取 30 分钟 取出 放置至室温 用流动相稀释至刻度 摇匀 滤过 即得 4 方法考察 4 . 1 线性关系 精密称取甘草酸铵对照品 12.9mg,置 5ml 量瓶中 加甲醇溶解并稀 释至刻度 摇匀 作为储备液 分别吸取适量 用甲醇稀释成 0.0086,0.0215,0.0430,0.0645 0.0860,0.1075mg/ml 的对照品溶液,取 10ul 进样 在上述色谱条件下进行测定 以进样量 ug 为横座标 峰面积积分值为纵座标 绘制标准曲线 得回归方程 A 2224000c-36000 r=1.0000 表明甘草酸铵进样量在 0.086 1.075ug 范围 与峰面积积分值呈良好的线性关系 近似为一通过原点的直线 因此采用外标一点法测定 4. 2 精密度试验 同一供试品溶液 照质量标准方法 在同一条件下连续进样 进行 精密度试验 测得甘草酸的峰面积积分值均值 1.01e+06 RSD 2.36%(n=5) 4. 3 重现性试验 称取批号样品 5 份 每份 0.5g 精密称定 照质量标准 方法独立试验 测定结果均值 1.79mg/粒 RSD 2.37%(n=5) 4. 4 稳定性试验 同一供试品溶液 照质量标准方法 在0 2 4 16 24 小时 分 别测定甘草酸峰面积积分值 均值 1.01e+06,RSD=2.51% (n=5) 4. 5 专属性实验 取缺甘草的阴性样品 按 3 . 2 项下方法提取并按