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2017年高中生物第1章无菌操作技术实践第2节分离特定的微生物并测定其数量课件苏教版选修1
1.实验室中分离微生物的方法有平板分离法和选择培养分离,平板分离法常用的有涂布平板法和混合平板法。 2.针对某种微生物的特性,设计一个特定的环境,使之特别适合这种微生物的生长,而抑制其他微生物的生长。这种通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术称为选择培养分离。 3.测定微生物数量的常用方法有涂布平板法和显微镜直接计数法。涂布平板法计数的结果与待测样品中真正的含菌数量相比往往偏低。 4.涂布平板法培养和计数微生物的流程为:准备实验器材→采集土壤,制备悬液→选择适于分离特定微生物的培养基→接种→培养与观察→计数菌落。 5.涂布平板法计数微生物的公式:每克土壤样品的细菌数=某一稀释度几次重复培养后的菌落平均数×稀释倍数(涂布所用稀释液为1 mL) 核心回扣 网络构建 知识点一 知识点二 当堂即时达标 微 生 物 的 分 离 选择 固体 单个菌落 混合平板 固体 选择培养 抑制 菌落 固体 形态结构 生长群体 形状 颜色 分类 细菌菌落出现在平板表面及内部 菌液与琼脂混合,共同倒平板 取一定稀释度的样品与熔化的琼脂混合 ↓ 将与样品混合后的琼脂倒入无菌培养皿 混合 平板法 细菌菌落通常仅在平板表面生长 先制作琼脂平板后加入菌液 取一定稀释度的样品涂布平板 ↓ 用无菌玻璃刮铲将样品涂布均匀 涂布 平板法 结果 特点 操作 比较 需要玻璃刮铲 需要接种环 ④ 可计算菌液中的活菌数 不可计算菌液中的活菌数 ③ 培养基中加有琼脂 培养基中不加琼脂 ② 不需无菌操作 需在无菌条件下操作 ① 稀释涂布平板法 平板划线法 比较方面 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL 15.0 g 琼脂 ⑥ 1.0 g 尿素 ⑤ 10.0 g 葡萄糖 ④ 0.2 g MgSO4·7H2O ③ 2.1 g Na2HPO4 ② 1.4 g KH2PO4 ① 含量 成分 编号 土 壤 微 生 物 的 分 离 、 培 养 与 数 量 测 定 稀释倍数 血球计数板 载玻片 25 400 盖玻片 毛细滴管 5 稀释倍数 纤维素 土壤悬液 接种培养 每毫升原液含菌株数=培养基上平均菌落数×稀释倍数(涂布所用稀释液为1 mL) 每毫升原液含菌株数=400×104×每小格平均菌株数×稀释倍数 计算 公式 操作较复杂,且有一定误差 死菌、活菌都计算在内 缺点 计数的是活菌 计数方便、操作简单 优点 培养基上菌落数 菌株本身 计数 依据 培养基 显微镜、细菌计数板 主要 用具 间接计数法 直接计数法 项目
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