基于巯基乙胺自组装单层膜的乙酰胆碱脂酶生物传感器用于农药检测.pdfVIP

基于巯基乙胺自组装单层膜的 乙酰胆碱脂酶生物传感器用于农药检测 陈雯娟，杜丹’，李海兵 (农药与化学生物学教育部重点实验室，华中师范大学，武汉430079) 摘要：本文介绍了一种新型电流型酶传感器及其在农药检测方面的应用。该 方法将乙酰胆碱脂酶固定在巯基乙胺自组装膜和CdTe修饰的金电极表面。农 药的抑制作用引起了乙酰胆碱脂酶催化活性的降低。这种电流信号的减小与农 药浓度有关。 关键词：生物传感器；巯基乙胺；自组装；量子点；乙酰胆碱脂酶；农药 电极和氧化还原酶之间的电子转移是电化学 2结果讨论 生物传感器作用机理中的一个重要步骤。这就要 2．1 AChE．CdR．C州Au修饰电极的循环伏安表征 求界面存在合理的快速电子转移和生物兼容性。 循环伏安曲线显示固定于巯基乙胺自组装单 mmol／L 将酶固定在有序的单层或多层系统中对于生物传 层膜修饰电极表面的AChE在3 ATCl的 感器和生物电设备的构建有非常重要的意义。作 PBS缓冲溶液中(pH7．0)表现出一对明显的氧化 ·为一种修饰表面的方法，自组装单层膜技术由于其 还原峰，峰电位分别为O．86V和0．62V。这一电 简单，多样以及在分子级别具有高度有序性，被 极过程是底物氧化和电化学产生物质进一步可逆 广泛用于固定酶于各种金属及氧化性表面[1以J。 还原的结果。为了进一步说明此对峰为AChE催化 本文讨论了乙酰胆碱脂酶生物传感器的表征方法 底物产生的峰，进行了对比实验。图l中曲线d为 及其在农药检测方面的应用。 1实验部分 7．0)的循环伏安图，没有明显的 缓冲溶液中(pH 1．1试剂 电化学响应。 氯化乙酰硫代胆碱(Signm公司)，巯基乙胺盐 U／rag从电 酸盐(Sisma公司)，乙酰胆碱酯酶(500 鳗中提取，Sigma公司)，西维因(Acct6tandard公 司)，CdTe纳米(华中师范大学)，磷酸盐缓冲溶液 《 鱼 7．O)。 ==t (PBs，pH 1．2修饰电极的制备 将金电极在piranha溶液(H2SO,t：30％I-1202= 3：1)中浸泡2rain以除去吸附在表面的有机物，然 EN 后在砂纸和O．c15胛铝粉上打磨，超声后在0．5 图1循环伏安图 mol／L H2so,中扫循环伏安进行电化学处理。然后 An bare mmol／L巯基乙 在室温避光条件下将其浸泡于50 a蛐 7．0)at iIlthe印觥of3mMATCIin0．1MPBS(pH 胺水溶液中8h，形成巯基乙胺自组装单层。取出 rateaf鼬剜|s 后用二次水冲洗多次以去除物理吸附于电极表面 的巯基乙胺。自然晾干后，将2皿