基于纳米金硫堇多孔壳聚糖膜固定癌胚抗原免疫传感器的研究.pdfVIP

第十届全国化学传感器学术会议论文摘要集 B生物传感器 B19 基于纳米金／硫堇／多孔壳聚糖膜 固定癌胚抗原免疫传感器的研究 刘亚西，袁若+，柴雅琴，洪成林，刘凯歌，管妹 (西南大学化学化工学院 发光与实时分析教育部重点实验室 重庆400715) 摘要：以多孔壳聚糖膜修饰的玻碳电极(6CE)为基质，利用戊二醛(GA)将硫堇(Thi)共价交联于多孔壳聚糖 型癌胚抗原(cE^)免疫传感器．考察了电板的表面形态及电化学特性，并对该免疫传感器的性能进行了详细的研 ng-mL一，检测限为0．24ng·mL～．实 究．该免疫传感器对CEA的检测范围为O．5一i0．0ng·mL。和10．0—160．O 验结果表明，该方法所制备的多孔壳聚糖膜有利于电子传输，并且可固定更多的Thi以吸附更多的nano—au，从而 提高了抗体的固定量，增强了传感器的灵敏度和稳定性． 癌胚抗原(CEA)作为目前国际上公认的肿瘤标志物，其检测具有重要意义【1】。目前已经发 展了多种分析方法用于CEA含量的测定，其中免疫传感器分析法具有广泛的应用前景。本文首 先将壳聚糖与二氧化硅纳米粒子电沉积于电极上，用戊二醛交联提高壳聚糖的稳定性，再用 NaOH除去Si02NPs，制得了多孔壳聚糖膜，其表面具有很多纳米级小孔，有利于电子传递， 且有助于利用GA固定更多的硫堇，进而共价结合和静电吸附更多的纳米金，最终提高了癌胚 抗体的固定量，制得了性能优良的电流型癌胚抗原免疫传感器。 1 实验部分 I．I免疫传感器的制备 min，再置于GA溶液中交联，然后放 首先将电极放入Chit．Si02NPs复合物中电沉积5 h， 入NaOH溶液中浸泡后制得了多孔壳聚糖膜修饰电极。接着将电极放入Thi溶液中浸泡0．5 洗净后将电极浸入llano．Au溶液中约4h，随后利用纳米金层吸附anti．CEA，最后用BSA封闭 电极。 2结果与讨论 2．1电极的电化学特性 图l为循环伏安表征图，裸玻碳电极在HAc．N／L／kC缓冲溶液中无氧化还原峰(图la)。当 形成多孔壳聚糖膜后，电流增大(图Ib)，说明其有助于电子传递。当Thi吸附到电极表面后， 出现一对明显的氧化还原峰(图Ic)。图1d是在电极上进一步修饰nano—Au后的循环伏安图， 纳米金具有的良好导电性及增强电子传递的能力使氧化还原峰电流均增大。当固定上anti—CEA 后，氧化还原峰电流减小(图le)。图lf，lg分别为BsA封闭和固定上抗原分子后的循环伏安图， 氧化还原峰电流进一步明显降低。 2．2传感器对CEA抗原的响应性能 5．5 在最优的实验条件下，将免疫电极置于不同浓度的CEA溶液中孵育10rain后，再在pH HAc．NaAc缓冲溶液中进行CV检测，其峰电流随抗原浓度的增加而不断减小，图2为该电极 的响应曲线，免疫电极的峰电流与CEA浓度在0．5--10．0ng．n“1和10．0-160．0ng·ⅡlL。1范围内 保持良好的线性关系，检测限为O．24ng．mEl。实验结果表明，该免疫传感器制备简单，线性范 国家自然基金资助项目 围宽，抗干扰能力强，同时灵敏度和稳定性也较好。 E，V 图1 不同电极的循环伏安图 (a)：bare GCE；Co)：porous CI(ng-mL’ 图2免疫传感器对CEA的响应曲线 参考文献： Adam．J [11 K，Odhav KD．Imnlulle in B，Bhoola responses l1