基质金属蛋白酶-9基因表达与心绞痛病情程度、危险度分层相关性研究.pdfVIP

中国中医急症 2013年2月第 22卷第 2期 JETCM．Feb．2013，Vo1．22，No．2 · 281 · 基程 质度 金属蛋白酶一9基因表达与心绞痛病情 、 危险度分层相关性研究 陈 义 苏 伟 (南京 中医药大学附属无锡 中医医院．江苏 无锡 214000) 中图分类号 ：R541．4 文献标志码 ：B 文章编号 ：1004—745X(2013)02—0281—02 【摘要】目的 初步探讨基质金属蛋白酶一9(MMP一9)基因表达与心绞痛分级、危险度分层间的相关性。方法 将研究对象分为健康体检组、稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组。入院初对其危险因素进行评估，并对心绞 痛组进行严重程度分级、危险度分层。结果 不稳定型心绞痛组外周血单核细胞 MMP一9mRNA表达 明显高 于稳定型心绞痛组、健康体检组，并且随着心绞痛分级升高，单核细胞MMP一9mRNA表达水平依次升高，其 中Ⅳ级Ⅲ级、Ⅱ级、I级，Ⅲ级Ⅱ级、I级，心绞痛初期外周血单核细胞 MMP一9mRNA表达水平 ：高危组 中危组、低危组。结论 心绞痛患者治疗初外周血单核细MMP一9mRNA表达增加反映了斑块的活动性 【关键词】 基质金属蛋白酶一9 基因表达 心绞痛 分级 危险度分层 心绞痛是冠心病 的常见类型，冠状动脉 内易损斑 Na2抗凝 ，全血 0．3mL采用 3S柱离心式血液总 RNA 块纤维帽破裂、局部血栓形成是引起心绞痛病情进展 抽提试剂盒 (K3620上海博彩生物科技有限公司)抽提 的主要发病机制 。目前认为斑块纤维帽破裂是 由于纤 RNA，RNA提取物一8O℃保存。@MMP一9mRNA表达 维帽细胞外基质合成和崩解失去平衡的结果，即崩解 水平测定：通过实时荧光定量 PCR技术进行相对定量 多于合成。研究发现在正常 内膜 ，细胞外基质(ECM)的 检测。全血总RNA合成 eDNA使用TAKARA反转录 合成和降解是平衡的，而在动脉粥样硬化的内膜 ，特别 反应试剂盒 (DRR037S大连宝生物工程有限公司)。实 是易损斑块 ，基质的降解 占优势_1]。基质金属蛋 白酶 时荧光定量 PCR反应体系为 20 L，包括 2xSYBR~ (MMP)特别是基质金属蛋 白酶一9(MMP一9)，在降解细 PremixExTa ，1～100ngeDNA，50pmo~L引物。两 胞外基质，使斑块纤维帽的崩解和随后的斑块破裂 中 步法 PCR循环条件 ：预变性 95℃ 30s为 1个循环 ． 起重要作用。研究表明，易损斑块局部 MMPs主要来源 变性 95℃ 5S，退火／延伸 60℃ 20s共 40个循环。溶 是单核一巨噬细胞，而MMPs主要成分是MMP一9[2-3] 解曲线分析95℃ 1s，65℃ 15s，95℃ 1s。③相对定 量分析 ：采用 LightCyclerRelativeQuantificationV‘er- 1 资料与方法 sion1．5)软件 ，标准化 比值计算公式采用 2-an~法 ， 1．1 临床资料 选取 2011年 02月至 2011年 l0月 △CT (患者样本)=CT 目的基因一CT内参基 因．△CT 本院心血管内科门诊和住院患者 125名，其中28名为 (校正品)=CT 目的基 因一CT内参基因，△△CT=△CT 健康体检者，97名为心绞痛患者 。人选者均除外各种 (患者样本)-ACT(校正品)。 急慢性炎症、结缔组织病、肿瘤、风湿性心脏病、肝肾疾 1．3 统计学处理 应用 SPSS13．0统计软件。计量资 病等。稳定型心绞痛诊断标准参照中华医学会心血管 料以(艇 )表示 ；两组间比