小分子有机酸与人血清蛋白相互作用的光谱研究.pdf

第24卷，第11期 光谱学与光谱分析 20 and 04年11月 Spectrcs,copySf)ectralAnalysis November，2004 小分子有机酸与人血清蛋白相互作用的光谱研究 刘媛，谢孟峡’，康娟，蒋敏 北京师范大学分析测试中心，北京100875 摘要研究了芥子酸、莽草酸和投食子酸与人血清白蛋白的相互作用。得到了一些有意义的结果。 主题词人血清白蛋白；FTlR；荧光光谱；二级结构；芥于酸；没食子酸；莽草酸 中翻分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000—0593(2004)11—0115—02 芥子酸(SA)和没食子酸(GA)分别属于苯甲酸类和苯乙4．04+1．0z。r=0．9798。可以得到GA的结合位点数”和 烯酸类多酚酸，它们对引发正常细胞组织变异的自由基都具 结合常数K．分别为0．7和1，1×104L·mol～。可见。SA在 有清除作用，是良好的天然抗氧化剂。莽草酸(sI)是合成多0．1c。。／c。融5时在USA上有一个较弱的结合位点．当5 酚类化合物的重要原料，也是植物合成芳香类氨基酸的重要 前体。奉实验将运用蛋白质酰氨Ⅲ带和酰氨I带结合的方法 发生了很强的结合。GA则在实验浓度范围内以n=l与 对它们与HSA结合引起的二级结构变化进行定量分析，并 HSA发生较强结合。 结合荧光实验结果探讨蛋白一有机酸的结台作用与有机酸分 子结构之间的关系，希望对阐明它们的作用机理提供有用的 信息。 1．有机酸与HSA结台反应的猝灭机理确定殛结合常数、结 合位点数、结合距离计算 随着芥于酸和没食子酸浓度的增加，HSA的色氨酸发射 (_‰蕾．p3)|wS 峰发生了明显的猝灭，说明HSA与这两种酸结台并使色氨 酸周围的微环境发生了改变，}{sA分子的空问构象发生了变 化。而莽草酸几乎不引起HSA色氨酸峰的明显猝灭，说明和 蛋白质之间没有结合。对芥子酸和没食子酸，用Stem- logQ (矗) Volmer方程F0／F=l+^口rⅡ[Q]求得两种酸猝灭HSA的^口 分别为4．47×10”和1．32×10“L·mol’1·s～，远大于各类 L· 碎灭剂对生物大分子的最大扩散猝灭常数2，0×1010 mol～·3～，因此动态猝灭不是荧光猝灭的主要原因。 假设SA和GA对HSA的猝灭主要为静态猝灭，按照静 器 惑{ ／／ 态猝灭公式(1)进行线性回归(见图1)，对 。 ；鞫 ／／ ，p—m f 譬 (1) j lg∑铲=lgKA+nlg[Q】 SA得到两条回归曲线，两条曲线在csalcma≈5处交叉，说 习／ 明SA在不同药物蛋白浓度比范围内在HSA上有不同的结合 位点数。当0．1csAkF酗5时，线性回归方程为Y=3．40 logQ (b) L· +0．7x，r=0．9976．H和K^分别为0．7和2．5x103 cⅡrr∞ofHSAflllorescenee Fig．1 Logarlthrnie quenching mol～；当5f驵／c+融30时，线性回归方程为y=8．69+ induced aci