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4.1 生物成分的分离与测定技术 课件 苏教版选修1.ppt
●课标要求 1.结合离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质的知识掌握其方法原理和方法要领。 2.结合蒸馏、电泳等相关知识掌握其原理和操作流程。 3.结合提取橘皮中芳香油的知识掌握利用蒸馏法提取橘皮中的芳香油。 ●课标解读 1.掌握分离与测定生物成分中蛋白质的技术。 2.掌握采用醋酸纤维薄膜电泳的方法分离并纯化蛋白质。 3.掌握采用水蒸气蒸馏法和脂溶性有机溶剂提取法提取脂肪成分。 ●教学地位 本节内容系统介绍了离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质、蒸馏、血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳、提取橘皮中的芳香油等知识,是本章的核心内容之一,是高考中的常考内容。 ●教法指导 1.可利用多媒体动画展示离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质的过程。 2.可充分创造实验条件让学生提取橘皮中的芳香油。 ●新课导入建议 可通过展示相关图片,创设问题情景导入本课。 ●教学流程设计 1.离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质的原理是一样的。(×) 【提示】 不一样,前者是离心沉降,后者是根据半透膜的透性。 2.凝胶色谱法是根据蛋白质分子的大小而对其进行有效分离的方法。(√) 3.醋酸纤维薄膜电泳是采用滤纸为支持物的电泳方法。(×) 【提示】 采用醋酸纤维薄膜为支持物。 4.振荡处理后,芳香油位于分液漏斗中液体的下部。 (×) 【提示】 上部。 【问题导思】 ①凝胶色谱法分离蛋白质的原理是什么? ②蛋白质分子的大小不同在凝胶中的运动情况有什么不同? 【问题导思】 ①醋酸纤维薄膜电泳的特点是什么? ②如何消除电荷对蛋白质迁移速度的影响? 1.原理 带电粒子在电场中向与其带电性相反的电极泳动的现象称为电泳。 2. 过程 配制试剂→架滤纸桥→浸泡薄膜→细心点样→平悬薄膜→实施电泳→染色→漂洗→脱色。 3.特点 (1)电泳后区带界限清晰。 (2)通电时间较短(60~90 min)。 (3)醋酸纤维薄膜对各种蛋白质都几乎完全不吸附,因此无拖尾现象。 (4)醋酸纤维薄膜对染料也没有吸附,因此不结合的染料能完全洗掉,无样品处几乎完全无色。 C.β球蛋白的相对分子质量一定比α球蛋白的相对分子质量大 D.在pH为8.6的巴比妥缓冲液中γ球蛋白迁移速率最慢,清蛋白迁移速率最快 【审题导析】 电泳利用了分离样品中各种分子带电性质不同以及分子本身的大小、形状不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。 【精讲精析】 带电粒子在电场中迁移的速率是带电粒子带电性质、带电量、粒子大小、粒子形状共同作用的结果。 【答案】 C 【解析】 一般来说,带电颗粒直径越小,越接近于球形,所带净电荷越多,则在电场中的泳动速度越快;反之,则越慢。 【答案】 B 【问题导思】 ①植物芳香油的提取方法主要有哪几种? ②每种提取方法的原理、适用范围有什么不同? 【解析】 用蒸馏法分离植物有效成分时,温度会影响其性质,如果温度过高则破坏其结构,温度过低则分离不出其有效成分。如果在一定温度范围内延长蒸馏时间,就可以得到较多的植物有效成分。 【答案】 D 结 论 语 句 1.分离与测定生物成分中蛋白质的技术包括离心沉降法、薄膜透析法和凝胶色谱法等。 2.离心沉降法是通过控制离心速度,使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层,从而达到分离出不同种类蛋白质的目的。 3.薄膜透析法是利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性,使蛋白质与其他小分子化合物分离开。 4.凝胶色谱法是根据蛋白质分子的大小对其进行有效分离的方法。 1.(2013·泰州高二测试)细胞破碎后,各种蛋白质就会释放出来,再根据蛋白质的不同特性进行抽提。下列关于蛋白质抽提的措施中,不正确的是( ) A.酸性蛋白质可用稀碱性溶液抽提 B.水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)抽提 C.脂溶性蛋白质可用有机溶剂抽提 D.碱性蛋白质可用强酸性溶液抽提 【解析】 抽提蛋白质的基本原理是根据蛋白质的物理性质,加入不同的试剂后,使蛋白质溶于试剂中而抽提蛋白质。强酸、强碱都会使蛋白质变性而沉淀。 【答案】 D 2.(2013·信阳高二检测)离心沉降法是纯化蛋白质的方法之一,在这一过程中蛋白质会分层,这一现象与蛋白质的何种性质有关( ) A.酸碱性 B.所带电荷多少 C.分子大小和密度 D.种类 【解析】 根据蛋白质之间或蛋白质与其他分子之间在分子大小和密度上的不同,采用离心沉降法,使其分层而分离;酸碱性不同可用盐析法;所带电荷多少不同可采用电泳法等。 【答案】 C 【解析】 对于几种球蛋白来说直径相差不大,泳动速度的差异主要来自于所带电荷多少,由图可知球蛋白由右向左泳动,因右侧为负极,且γ-球蛋白距点样处最近,所以γ-球蛋白所带负电荷最少。 【答案】 D 4.有关透析的叙述,错误的是( ) A.用于透析的薄膜要具有选择透过性 B.透析膜是一种半透膜 C.
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