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A.将样品装入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋内,则分子丙也保留在袋内 B.若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则分子甲移动速度最快 C.若将样品以2 000 r/min的速度离心10min,分子戊存在于沉淀中,则分子甲也存在于沉淀中 D.若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子,则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最远 解析 分子甲的分子量最小,进入凝胶内部通道而移动速度慢;分子乙留在透析袋内,说明其相对分子质量比较大,分子丙比分子乙相对分子质量大,所以分子丙也留在袋内;分子戊比分子甲的相对分子质量大,故离心后分子甲可能不存在于沉淀物中; SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中的样品,其电泳迁移率完全取决于分子的大小,相对分子质量相差越大,形成的电泳带相距越远。 答案 A 考向预测二 血红蛋白提取和分离的程序和原理 6. 红细胞中含有大量的血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述,错误的是 A.血红蛋白提取和分离一般按照样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定的顺序进行 B.纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液 C.粗分离中透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质 D.可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定 解析 蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。提取和分离血红蛋白时,首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品处理;再通过透析法除去相对分子质量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去,即样品纯化,纯化过程中凝胶应用蒸馏水充分溶胀后,配制成凝胶悬浮液,而不是用生理盐水;最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 答案 B 考点四 植物有效成分的提取 植物芳香油提取方法的比较 【核心突破】 提取方法 水蒸气蒸馏法 压榨法 有机溶剂萃取法 实验原理 利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来 通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油 使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发溶剂获得芳香油 方法步骤 ①水蒸气蒸馏 ②分离油层 ③除水过滤 ①石灰水浸泡、漂洗; ②压榨、过滤、静置; ③再次过滤 ①粉碎、干燥 ②萃取、过滤 ③浓缩 适用范围 适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油 适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取 适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细 小,能充分浸泡在有机溶液中 优点 简单易行,便于分离 生产成本低,易保持原料原有的结构和功能 出油率高,易分离 局限性 致原料焦糊和有效成分水解等问题 分离较为困难,出油率相对较低 剂处理不当会影响芳香油的质量 【易混易错】 胡萝卜素粗品鉴定过程中的5个易错点 (1)层析时没有选择干净的滤纸,导致实验现象不明显:为了防止操作时对滤纸的污染,应尽量避免用手直接接触滤纸,可以戴手套进行操作。 (2)点样时点样圆点太大(直径大于2mm),导致最终在滤纸上形成一条线,无法辨认被提取的色素:点样圆点的直径应为2mm。 (3)将点好样的滤纸卷成筒状,卷纸时不能将滤纸两边相互接触:以避免由于毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快,溶剂前沿不齐,影响结果。 (4)层析液没及样品原点,色素溶解于层析液中,造成实验失败:层析液不可没及样品原点,以免色素溶解于层析液中,使鉴定失败。 (5)没设置标准样品作对照:层析液中是否提取到胡萝卜素,可通过与标准样品中的β-胡萝卜素作对比予以确认。 【命题预测】 ★本考点高考在不同省份考查频度不同。 考向预测一 胡萝卜素的提取与鉴定 7.(2013·山东理综) 胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得,流程如下: (1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用___________或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环,其目的是_________________。 (2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供_______和____________。 (3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和_______,以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用____________方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤。其目的是______________________。 (4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为______________。 解析 (1)微生物接种常用稀释涂布平板法和平板划线法,为了防止其它杂菌的污染,接种过程要进行无菌操作,接种前对接种环灼烧是为了杀灭接种环上的微生物。 (2)蔗糖主要提供碳源,也可作为能源物质,硝酸盐含氮元素,可提供
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