微流控芯片用于单细胞分析展望.pdfVIP

微流撺芯片实验宜进展 微流控芯片用于单细胞分析展望L／ 程介克王宗礼 武汉丈学分析科学中心，武汉430072 单缅绝分析是分析化学、生物学和蹉学之间渗透发展形成的跨学科前沿领域。细胞是生 命活动晌基本单位，为了掌握生命进程的规律，必颁以研究细胞为基础，深入探索细胞的行 为，如图所示”。近年来，微流控芯片川于单细胞分析，实时监测细胞释放，及高通量阵 列检测等方面十分活跃。芯片的单元操作可根据需要，灵活组台，显示出其独特的优点。此 文对微流控芯片用r单细胞分析的前景进行丁展望。 h邮 Im叭d■●H¨nI叫 ：：凝：蒿：：搦。。 mmq№r佃№q口¨日自Ⅳ咖n 目 m臆抽^Ⅱ输出自应白勺机q 1 毛细管电泳与微流控芯片技术 1988年，Ewing首敬采埘毛细营屯泳分析单细胞。由1：毛细箭电溶柱内径与细胞大小相 当，适r单细胞分析，获得蓬勃发展，已r泛麻Hj丁蛋白质分析、神经科学、肿瘤学等领域。 近年来，单细舰分析的方泣学已从毛细管屯溶(cE)发展到微流控芯片，多种光学、扫描电化 学、原予力、扫描隧道娃微镜等幽像分析，质谱，动力学分析．各种新颖荧光探针、纳米链 子点及纳米技术的麻川，细胞外活体分析等。使单细胞分析早现砸彩缤纷、光辉灿烂的前景。 一部单细胞分析专著“，反映了我国研究成粜及国内外最新发腱。在单细胞分析方面是目前 仪有的一奉参考‰ 18 毛细符电泳用r单细胞分析，至今共技袭文章115篇。白2000年以来，每年保持发丧8 篇文章，未兄增长趋势。网此，cE用丁单细胞分析研究，已进入成熟稳定期。cE主要适阁下 单细胞中化学组分的分离及检测，对生物医学中要求实时监测单细胞释放，由于细胞内生化 反应人多在毫秒级，(_E分离时间以分计，批不能适应，很少见到报道。从发展来看，cE虚发 挥桂较长(与芯片比较)．分离效率离的特点，实川于二单细胞中复杂维分的分离及检测，如用 于单细胞蛋内组分析等。微流控芯片用于单细臆分析，较cE约晚10年，自2000年发表第l篇 共发表文章52篇，2006年发表文章20篇，超过发表文章总数的1／3。从发表文献来看，微流 控芯片用于单细胞分析均娃于蓬勃发展时期，2007年卜5H，微流控芯片用于单细胞分析综 述就见到4篇3…，充分显示出其迅速发展的前景。国内由于微电子机械技术比国外落后至少 5一lO年，在芯片上集成微裂、微随厦多维芯片等还很少见报道。国内研究J．作起步不晚-但 在微流挖芯片硬件加工方面，若距在加_人。在2006年fIj，微流控蒜片用于单细胞分析发表20 篇文章中，国内r作仅2篇(rtil0％)；但在cE用于单细胞分析发表20篇文章中，圈内工作有4 大会报告 篇(占40％)。因此，根据国内条件，芯片加工技术落后，经费严重不足(为技术先进国家相同 工作研究人员的1-3％)，如何发挥聪明才智，赶超国际先进水平，对我国分析化学研究人员 是一个严峻的挑战。 2 微流控芯片与细胞界面 Zare研究组H1在微流控芯片上操纵、溶胞、标记、电泳分离及测定单个昆虫细胞(SF9) 中低含量蛋白质(1000个分子／每个细胞)，采用高灵敏单分子荧光计数器，获得满意的结果。 最近，在美国院士有关未来讨论会上，集中讨论基础研究时，认为纳米技术材料用于生物医 学分析，开始显示出有希望的平台，但在细胞与芯片界面控制及测量方面仍存在挑战旧1。未 来在细胞与芯片界面要形成集成系统，能高分辨分析及控制细胞生理。如样品与试剂引入通 道，混合，分选出单细胞。阵列次微米探针刺激或检测细胞核、细胞质，或细胞外空间。如 在细胞骨架内反应，产生代谢物质，如N0及ROS。纳米探针连接到细胞内蛋白质络合物。主 要的挑战是在纳米级探索细胞生物学，将来的芯片实验室必须有能力实时读出及解释大量集 成的阵列信号，蓝具有充分的信噪比，阵列传感器应具有纳米级空间分辨及毫秒级时间分辨 率，且芯片应能重复制取。战胜这些挑战，未来分子电子器件的设计，应从