2.1植物细胞工程的基本技术规范.ppt

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专题2 细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平上的操作,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 什么叫细胞工程? 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念: 按操作对象分 植物细胞工程 动物细胞工程 已高度分化组织 完整植株? 2.1植物细胞工程 §2.1.1植物细胞工程的基本技术 离体的植物组织、器官或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 胚状体或丛芽 完整植株 植物组织培养过程 一定的营养物质、激素 含不同激素的 分化培养基 (1)脱分化: 实质是恢复细胞的全能性过程。 已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程,又称去分化。 (2)愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,形成细胞排列疏松无规则,一种高度液泡化、无定形状态的薄壁细胞。 (3)再分化: 脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化成根或芽等器官的过程。 思考1:为什么花瓣可以培育成完整植株? 植物细胞具有全能性 (4)细胞全能性概念: 具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能,即每个细胞都具有全能性。 具有全能性原因:都有发育成完整个体所必需的全部遗传信息。 ?受精卵 生殖细胞 体细胞 > ?植物细胞>动物细胞 >胚胎干细胞> ③分化程度越高,全能性越小,增殖的细胞 不增殖的细胞。 (5)全能性大小: > 思考2:生物体内的细胞为什么没有表现出全能性,而是分化成不同的组织器官? 在特定的时间和空间条件下,基因选择性的表达的结果。 1、有关全能性的表述中,不正确的是( ) A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体,因此全能性最高 B.生物体内细胞由于分化全能性不能表达 C.卵细胞和受精卵一样,细胞未分化,全能性很高 D.植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性 C 练习: 一、植物组织培养技术 在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 2、理论基础: 细胞的全能性 1、概念 3、细胞表现全能性的条件 (1) 状态 (2) 操作 (3)适宜物质的诱导和调节(植物激素主要 是 ) (4)种类齐全、比例适合的 . (5)适宜的外界条件( 等) 离体 无菌 生长素和细胞分裂素 营养物质 温度、pH、光照 切取形成层 接种到诱导培养基 (避光) 愈伤组织 试管苗的形成 移栽 脱分化 再分化 接种到分化培养基 (需光) 外植体 实验:胡萝卜的植物组织培养: 1.在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作? 特别提醒: 防止杂菌污染,因为杂菌生长快,会和培养物争夺营养。杂菌生长过程中会产生有害的物质,导致培养物迅速死亡。 2.在本实验中,切取胡萝卜块根时强调要切取含 部分,原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。 胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花),是否也能培养成小植株? 可以,只是诱导愈伤组织比较困难。 3.为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养 (暗培养)? 暗培养有利于细胞的脱分化,产生愈伤组织,在有光时,往往容易形成维管组织,而不易形成愈伤组织。 形成层 4.请根据上面的实验过程,概括出植物组织培养技术的流程简图。 制备外植体(离体的植物器官、组织活细胞) 脱分化 无菌接种、一定的营养、激素诱导 愈伤组织 再分化 调整激素比例 胚状体 移栽到大田,培养成正常植株 5.决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么? 植物激素的种类和比例 试管苗 2、下列属于组织培养的是 ( ) A.花粉培养成单倍体植株 B.芽发育成枝条 C.根尖分生区发育成成熟区 D.未受精的卵发育成植株 A 练习 因为不同种生物之间存在着生殖隔离,所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。 二、植物体细胞杂交技术 这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么? 理想图 1.植物体细胞杂交定义: 用两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞,且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。 2、优势: 打破了不同种生物间的生殖隔离限制,克服了远缘杂交不亲合的障碍。 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁

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