乳酸制程.ppt

溶氧值: 米根黴在發酵生長過程中是需要氧氣的，對米根黴發酵產L(+)乳酸的影響，當溶氧值越高時，L(+)乳酸的產量也會相對提高。 酸鹼值 一般適合黴菌生長的酸鹼值約在pH 4 到6 之間， 而大部份米根黴發酵產乳酸的研究，其pH 值大多落在4.3 到6 之間， 因為米根黴在生長時會代謝出有機酸，故在前培養時期大多會加入碳酸鈣，以維持培養液中的酸鹼值在5.5 左右。 資料來源:米根黴菌在攪拌式發酵槽中生產 L(+)-乳酸之研究 研究生:翁國祐 資料來源/cjbcn/ch/reader/create_pdf.aspx?file_no=glag=1journal_id=cjbcn 本品主要成份為海藻酸的鈣鹽，可含有少量成份的鈉鹽 生產方法:由海藻酸與氫氧化鈣或碳酸鈣反應而得。 資料來源/cjbcn/ch/reader/create_pdf.aspx?file_no=glag=1journal_id=cjbcn 最常用的是碳酸鈣，這是很難進行消毒，不易添加到生物反應器，所以用海藻酸鈣包埋法。 採用固定化米根黴發酵生產L-乳酸,與遊離發酵相 比, 可大大縮短生產週期, 並且解決了發酵過程中 出現的結團現象, 傳質效果好。 資料來源/cjbcn/ch/reader/create_pdf.aspx?file_no=glag=1journal_id=cjbcn 有擋板發酵槽的米根黴團塊狀生長情形 無擋板發酵槽的米根黴團塊狀生長情形 資料來源:米根黴菌在攪拌式發酵槽中生產 L(+)-乳酸之研究 研究生:翁國祐 培養方法: (1)液體種子增殖培養:裝液量50 mL/250 mL 三角瓶, 115℃滅菌15 min,接種1 mL孢子懸液 (5×106個/mL), 180 r/min搖床上32℃振盪培養。 搖瓶發酵: 發酵培養基裝液量50 mL/250m三角瓶, 115℃滅菌15 min,在200 r/min搖床上32℃條件下培養72 h。 資料來源/cjbcn/ch/reader/create_pdf.aspx?file_no=glag=1journal_id=cjbcn 發酵初期的8 h,乳酸與菌絲 體含量很少,即菌體生長與生產緩慢 24 h至60 h, 菌體迅速生長同時乳酸產量也隨之迅速增加,這段 時間是米根黴生長與生產旺盛期 60 h後,乳酸含量 增加緩慢,菌絲體含量變化不大,發酵進入穩定期。 72 h,乳酸產量達最高值。 資料來源/cjbcn/ch/reader/create_pdf.aspx?file_no=glag=1journal_id=cjbcn 乳酸含量的測定按高效液相色譜校正的EDTA定鈣法進行 還原糖測定:3,5-二硝基水楊酸法 (DNS 法) 生物量測定:菌體乾重法 此法是利用乙二胺四乙酸(EDTA)會與金屬離子Ca2+螯合的原理並搭配鈣黃綠素指示劑來進行，得到乳酸的濃度。先在發酵液中加入過量的碳酸鈣，過量的碳酸鈣並不會增加EDTA 滴定量，而碳酸鈣會和乳酸反應生成乳酸鈣，再取定量的發酵液加入鈣黃綠素指示劑，鈣黃綠素是一種金屬螢光指示劑，會和鈣離子結合並呈現強烈的黃綠色螢光，而隨著EDTA 的加入，鈣離子會被螯合出來，最後當黃綠色螢光消失呈現橙色時即達滴定終點，藉由EDTA 的用量推算出鈣離子的濃度，再反算得到乳酸濃度。但是EDTA 定鈣法所測得之乳酸濃度與HPLC 法相比會偏高，準確率較低，但此法較不費時，且可先與HPLC 法對照，得到一校正係數，即可用來快速分析乳酸(鄭志et al., 2003)。 還原糖定量法(DNS 法) (Miller, 1959) 3,5-dinitrosalicylic acid（DNS）試劑之反應是利用DNS 具還原力之特性，因此碳水化合物只要具有游離或游離趨勢之醛或酮基，即能在鹼性溶液下有還原的能力而進行反應，反應式如以下： 3,5-dinitrosalicylic acid → 3-amino-5-nitrosalicylic acid （yellow） （orange-red） (式3.10) 於一定範圍內，顏色的深淺強度和還原糖濃度成正比，故糖的比例可在分光光度計波長540 nm 下，以標準葡萄糖檢量線來定量樣品中的還原糖濃度。 由於乳酸產生菌的抑制強酸性環境中，發酵液pH值必須保持高於 4.5，而最好在範圍約 6.0至6.5。為了維持這種 pH值，適合水溶性物質或代理人基本是無毒的產酸菌，如鹼金屬氫氧化物，碳酸鹽或碳酸氫鹽或鹼土金屬氫氧化物或碳酸鹽，通常添加到發酵液，以正在生產中和酸。 鹼聵料在生產中加到發酵