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抗病毒药物香菇多糖细胞催化微生物菌种筛选研究 杨胜利，钱俊青，夏楠 浙江工业大学药学院 摘要：本文介绍了，用超临界 CO2 法对目标微生物进行诱变，获得酶活高的微生物菌株，对其进行 种子液培养和发酵液培养后，利用微生物胞外酶催化，进行香菇多糖和过量丙酸的酯化反应，酯化 反应在不同温度，不同反应时间下进行，然后用0.25mol/L 的NaOH 滴定酯化反应后剩余的丙酸，用 1.0%酚酞做指示剂，以 NaOH 滴定结果来判断酯化结果。通过单因素考察反应时间、加酶量、多糖 加量和反应温度等条件变化对酯化效果的影响，在单因素结果指导下，对反应涉及的因素进行分析 实验，以确定反应的最优条件—— 多糖用量0.1g ，酶用量3ml，反应时间30min，反应温度35℃。并 对最优条件下获得的酸脂混合物进行醇沉分离，将醇沉物冻干，测定红外光谱，证实有酯键生成。 关键词：香菇多糖 纯化 酯化 诱变 超临界流体 The Investigate of Microbiology Esterify Technology about Antivirus Medication Lentinan Yang Shengli ，Qian Junqing ，Xia Nan The College of Pharmaceutical Science, Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, PR China Abstract: Use of supercritical CO on the microorganisms for mutation, getting the microbial strains with 2 higher activity. Use lentinan esterify with propionic Acid , Microbial extracellular enzyme as catalyzer. Through single factor experiment ,get the best esterify condition.The best react temperature is 35 ℃，the best react time is 0.5h,the best dosage of lentinan is 0.1g,and the best dosage of enzyme is 3ml. Detecting the products under IR, confirmed the formation of ester. Keyword: lentinan purification esterify Supercritical Fluid 1 前言 多糖是组成生物高分子家族中的一个最丰富多彩的成员，它是由单糖组成的天然高分子 化合物，已知的天然多糖化合物约有300 多种，如真菌多糖、植物多糖、动物多糖、藻类多 糖、细菌多糖等，广泛存在于植物、动物和微生物组织中。近代生物化学一直把多糖视做生 物体中维持细胞组织结构和提供能量来源的物质，没有给以足够的重视，多糖的发展较蛋白 质、核酸晚得多，加上多糖本身的极其复杂性，目前研究水平要大大落后于蛋白质和核酸的 研究，近二十年来，由于分子生物学和细胞生物学的发展，加上对膜的化学功能、免疫物质 的化学研究及新药物资源的研究开发，发现多糖及缀合物参与了细胞中的各种生命活动，具 有多种生物学功能，如细胞特异性识别，细胞表面对各种抗原和药物的受体，激活免疫细胞， [1- ] 抗肿瘤等 7 ，因此引起人们极大的兴趣，成为研究的热点，而其中最为人们关注的就是食药 [8] 用真菌多糖的研究。经研究发现经过酯化的多糖生物学活性更高，尤其是抗病毒活性 。 本论文采用微生物催化的方法对香菇多糖进行酯化。并希望能够求得一种合适的酶，能 够高效