1.2基因工程的基本操作程序答辩.ppt

Taq DNA聚合酶(thermus aquaticus) 酶活性(%) 温度(℃) 40 50 60 70 80 90 100 100 80 60 40 20 PCR技术扩增与DNA复制的比较 PCR技术 DNA复制 相同点 原理 原料 条件 不同点 解旋方式 场所 酶 结果 碱基互补配对 四种脱氧核苷酸 模板、能量、酶 DNA在高温下变性解旋 解旋酶催化 体外复制 细胞核内 热稳定的DNA聚合酶 细胞内的DNA聚合酶 大量的DNA片段 形成整个DNA分子 根据已知蛋白质的氨基酸序列,推测出相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测出它的结构基因的核苷酸序列,再通过化学方法,以单核苷酸为原料合成目的基因。 蛋白质的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 结构基因的核苷酸序列 推测 推测 目的基因 化学合成 (三)化学方法人工合成目的基因 人工合成 (基因比较小) DNA合成仪 从基因文库中获取 利用PCR技术扩增 利用化学方法人工合成 归纳:获取目的基因的方法 用一定的_________切割 质粒,使其出现一个切 口,露出____________。 用_____________切断目 的基因,使其产生_____ ____________。 将切下的目的基因片段插入质粒的______处, 再加入适量__

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