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环境监测中的微生物学方法 Contents 一、 环境污染的实质及监测方法 当环境受到污染后，环境的物理、化学、生物学特性发生变化，如：重金属离子、NO3- 浓度增加；水体污染变质，水生生物种类减少，甚至灭绝；导致环境功能的不健全，影响人类、动植物的正常生活。 二、空气的微生物学监测 1、固体法 奥氏公式： C=1000*50N/A*t 式中：C—空气细菌数； A——捕集面积，cm2 ； t ——暴露时间，min； N——菌落数，个。 经测定发现，用奥式公式计算的浮游细菌数比实测的浮游细菌少。此公式没有考虑尘埃粒子大小、数量、气流情况、人员密度和活动情况。 2、液体法 三、水质的细菌学检测 水质的细菌学检验 水质的细菌学检验 水质的细菌学检验 四、大肠杆菌的监测 大肠杆菌的监测 大肠杆菌的监测 大肠杆菌的监测 1、大肠菌群指数是指每升水中所含的大肠菌群细菌的个数。 2、大肠菌群值则是指检出一个大肠菌群细菌的最少水样量（毫升数）。 3、大肠菌群值=1000/大肠菌群指数　　 4、我国饮用水的质量标准规定，大肠菌群指数不得大于3，大肠菌群值不得小于333mL。 滤膜法优点： 省时、省料、设备要求低； 可以采集较多的检验水样。 局限性： 易受悬浮物干扰； 受其它细菌的干扰； 受水样中毒物的干扰。 Thank You! * * L/O/G/O Content Layouts 报告人：许燕 环境污染的实质及监测方法 水质的细菌学检验 大肠杆菌的监测 4 1 2 3 空气的微生物监测 （一）环境污染的实质 化学方法 生物学方法 利用生物种类、数量的变化，生物学特性的改变来监测污染物对环境的影响。 可监测到污染物对环境的综合影响，但不易精确反映污染物的性质、浓度和数量 缺点：瞬时值 快速 定性、定量反映污染浓度 （二）环境污染的监测方法 空气的微生物来源 （一）空气的卫生学检验 土壤 水面 工农业产生 人和动物呼吸道排出微生物 机械性移动 微生物实验室操作不当 室外 室内 （二）空气微生物的卫生标准 301 严重污染 300 轻度污染 ~150 临界环境 31~125 普通空气 30 清洁空气 1~2 最清洁的空气（有空调） 细菌总数 清洁程度 表2-1 以细菌总数评价空气的卫生标准（个/m3 ） 0 1~2 200 5×103 2×104 (1~2)?106 微生物 北纬80o 海洋上空 市区公园 城市街道 宿舍 畜舍 场所 表2-2不同场所上空微生物的数量（个/m3 ） 尘埃多的地方，如畜舍、公共场所、医院、城市街道的空气中，微生物数量较多。高山、海洋、森林、积雪的山脉和高纬度地带的空气中，微生物较少。 固体法 液体法 平板计数法；用直径为D90mm或d100mm的培养皿 ；评价空气的清洁程度，需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。测定的细菌指标有细菌总数和绿色链球菌，在必要时则测病原微生物。 空气的微生物监测 （三）空气微生物的测定方法 平皿菌落法(沉降—平板法） 营养琼脂培养基融化倒人d90mm无菌平皿中制成平板。 它放在待测点(通常设5个测点)，打开皿盖暴露于空气5~10min 待空气微生物降落在平板表面上，盖好皿盖，置于培养箱中培养48h后取出计菌落数 前苏联奥梅梁斯基公式换算出浮游细菌数。 A B C D 缝隙采样器 吸风机或真空泵将含菌空气以一定流速穿过狭缝，抽吸到营养琼脂培养基平板上。 通常平板转动一周，取出置于37℃恒温箱中培养48h，据取样时间和空气流量算出单位空气中的含菌量。 狭缝长度为平皿的半径，平板与缝的间隙有2mm，平板以一定的转速(1 r／min、5-60r／min、60r／min)旋转。 1 3 2 撞击法 撞击法检测空气中微生物数量 培养前 培养后 液体法用于测定空气中的浮游微生物，主要是浮游细菌。 将一定体积的含菌空气通入无菌蒸馏水或无菌液体培养基中，依靠气流的洗涤和冲击使微生物均匀分布在介质中 取一定量的菌液涂布于营养琼脂平板上，或取一定量的菌液于无菌培养皿中，倒入15-18ml融化(45℃)的营养琼脂培养基，混匀， 待冷凝制成平板，置于37℃恒温箱中培养48h，取出，再以菌液体积和通入的空气量计算出单位体积空气中的细菌数。 1 2 3