食品微生物检验技术2012课件.pptVIP

②菌落总数计算方法 若只有一个稀释度菌落在适宜计数范围内，计算平均值X 稀释倍数；作为结果； 若两个连续稀释度的菌落都在适宜计数范围内时按公式计算： 报告 若所有稀释度平均菌落数均300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。 若所有稀释度的平均菌落数均30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。 若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。 若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，其中一部分300或30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。 报告 ③菌落数的报告 菌落数100内时，按四舍五入修约，以整数报告，≥100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，第三位数以四舍五入方法修约；取前两位数字，后面用0代替，也可用10的指数表示； 若平板上为蔓延菌落无法计数，则报告菌落蔓延； 若空白上长菌，则实验失败； 称重以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/ml为单位报告。 报告 菌落总数检测注意事项： 1 操作要在无菌的状态下进行。 2 操作时间越短越好。 3 样品不同选择的稀释倍数不同。 4 培养基冷却温度不宜过高或过低。 7.大肠菌群的测定 大肠菌群的定义：系指一群在37℃24小时能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌主要来源于人畜粪便，以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量。 检测意义：该菌主要来源于人畜粪便，故该指标体现了食品被粪便污染的程度。 7.大肠菌群的测定 －－基本概念 大肠菌群包括大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。大肠菌群的来源分粪便来源和非粪便来源，在44.5℃仍能生长的大肠菌群，称为粪大肠菌群，粪大肠菌群又叫耐热大肠菌群，在人和动物粪便中所占的比例较大，而且在自然界容易死亡。因此，粪大肠菌群对粪便污染的指示作用更为直接和贴切，主要就是大肠杆菌，但也包括克雷伯氏菌属，正是由于包括了克雷伯氏菌属，使其与粪便污染的相关性受到了影响。 大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌这三个指标在实际工作中都在应用，但用途有所不同，一般认为大肠菌群是水源的卫生指标和食品加工卫生状况的通用指标，粪大肠菌群主要用于贝类和贝类养殖用水的卫生指标，大肠杆菌用于指示食品受到近期粪便污染或不卫生加工。 大肠菌群表示方法：最可能数-MPN（ most?probable?number） /100mL 。 大肠菌群的测定流程 检样 25g（ml）+225ml稀释液，均质 10倍系列，稀释选择适宜3个连续稀释度的样品匀液， 接种LST肉汤管 产气 不产气 BGLB肉汤 产气 不产气 大肠菌群阴性 大肠菌群阳性 查MPN表—报告结果 36±1℃ 48±2h 36±1℃ 48±2h GB 4789.3--2010 1.LST:月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤 2.BGLB：煌绿乳糖胆盐肉汤 大肠菌群的测定步骤 检验稀释 取样及稀释方法与菌落总数检验方法相同。 初发酵试验 根据食品卫生要求或对检样污染程度的估计，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管LST,每管接种量为1ml。如接种量在1ml以上者,用双料LST。置36±1℃温箱内,培养24±2h,观察倒管是否有气泡产生，产气者进行复发酵试验，如未产气者则继续培养至48 ±2h，产气者进行复发酵试验。未产气者报告大肠菌群阴性。 复发酵试验用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物一环，接种于BGLB管中， 36±1℃温箱内,培养48±2h,观察倒管是否有气泡产生，产气者记为大肠菌群阳性管。 报告 根据证实为大肠杆菌阳性的管数，查MPN表，报告每100ml（g）大肠菌群的MPN值。 大肠菌群的测定 －－注意事项 初发酵阳性管，只能经过复发酵实验后，才有可能成为阳性。 在实际工作中，有时遇到初发酵时产酸，但导管内无气泡产生，复发酵却证实为大肠菌群阳性。有时导管内无气体，但在液面及管壁却可看到小气泡。 如何避免放小倒管时产生气泡（大肠菌群检测）？ 客户要求大肠菌群＜３／ml(g),请问如何检测和报告？ LST发酵管和BGLB发酵管在灭菌以后要检查小导管内有无气泡,如果有气泡就不能再用了。 计算产气管的数量时以BGLB发酵管产气管的数量为准。 国标另一方法：大肠菌群平板计数法 选择3个适宜稀释度接种VRBA平板 36±1℃ 18-24h培养 计典型可疑菌落 BGLB肉汤 36±1℃ 18-24h培养 报告 控制微生物污染食品的措施