电化学免疫传感器讲解.ppt

CONCLUSIONS The incubation period for catalytic reactions of enzyme labels can be effectively minimized in the electrochemical immunosensor employing GOx label-based EN redox cycling; The detection limit for CA-125 for the incubation period of 0 min was slightly higher than 0.1U/mL; The immunosensing scheme is of practical importance given that the total immunosensing time can be reduced without a large increase in the detection limit. 电化学免疫传感器Electrochemical Immunosensor 前言 电化学免疫传感器 文献汇报 前言——免疫分析 免疫分析（Immunoassay）：基于用抗体或抗原作为选择性化学试剂以分析测定抗原或抗体及半抗原的分析方法。 分子识别材料：抗原或抗体 分子识别基本原理： 分类 放射性免疫分析（RIA） 酶联免疫分析 （ELISA） 发光免疫分析 （LIA） 电化学免疫分析（ECIA） 前言——电化学免疫分析法 是将免疫技术与电化学检测相结合的一种分析方法 1951年，由Breyer和Radclif首次应用，用极谱法测定由偶氮标记的抗原 六七十年代后 电分析技术方法的发展： 液相色谱电化学分析 电化学流动注射分析 微分脉冲伏安法 阳极溶出伏安法 前言——免疫传感器 免疫传感器是将高灵敏度的传感技术与特异性免疫反应结合起来，用以监测抗原抗体反应的生物传感器。 免疫传感器 电化学 免疫传感器 质量检测 免疫传感器 热量检测 免疫传感器 光学 免疫传感器 电化学免疫传感器 电化学免疫传感器是将免疫分析与电化学传感技术相结合而构建的一类新型生物传感器，应用于痕量免疫原性物质的分析研究； 基于抗原/抗体反应的,可进行特异性的定量或半定量分析的自给式的集成器件,其中抗原/抗体是分子识别元件,且与电化学传感元件直接接触,并通过传感元件把某种或者某类化学物质浓度信号转变为相应的电信号。 电化学免疫传感器检测原理 免疫传感器的工作原理和传统的免疫测试法相似，都属于固相免疫测试法，即把抗原或抗体固定在固相支持物表面，以检测样品中的抗原或抗体。 工 作 电 极 换 能 器 检 测 仪 Ab(Ag) Ag (Ab) 电信号 电化学免疫传感器的分类 根据检测信号进行分类： 电化学 免疫传感器 电流型 电导型 电容型 电位型 电位型免疫传感器 基于测量电位变化来进行免疫分析的生物传感器。膜电位的变化值与待测抗原浓度之间存在对数关系。 直接型电位免疫传感器 酶标记电位型免疫传感器 直接型电位免疫传感器 利用抗原或抗体在水溶液中两性解离本身带电的特性,将其中一种固定在电极表面或膜上,当另一种与之结合形成抗原抗体复合物时,原有的膜电荷密度将发生改变,从而引起膜的Donnan电位和离子迁移的变化,最终导致膜电位改变。 酶标记电位型免疫传感器 将免疫化学的专一性和酶化学的灵敏性融为一体,对低含量物质的检测。 标记酶:辣根过氧化物酶（HRP）、葡萄糖氧化酶(GOx)、碱性磷酸酶和脲酶。 酶标记传感器(电位型或电流型),最后均可归结为是对NADH、苯酚、O2 、H2O2 、NH3及新近开发的电活性物质的检出。 电位型免疫传感器 电位型免疫传感器存在的主要问题是非特异性吸附和背景干扰，一般来说，生物分子的电荷密度相对于溶液背景来说比较低，这使得电位型传感器的信噪比一般都较低，同时，生物样品中干扰组分在电极表面的非特异吸附会带来干扰，影响了测定的可靠性，这些缺陷成为了电位型传感器应用于实际的障碍。 电流型免疫传感器 电流型免疫传感器是测定恒定电位下通过电极的电流信号来检测抗体或抗原的免疫生物传感器，待测物通过氧化还原反应在电极上产生的电流与电极表面待测物的浓度成正比。 分类 非酶标记电流型免疫传感器 酶标记电流型免疫传感器 非酶标记电流型免疫传感器 主要是根据抗原和标记抗原对定量抗体进行竞争结合，而标记抗原与抗体结合后氧化或还原电流减少。 标记的电活性物质：Fe(CN)63-/Fe(CN)64-、二茂铬铁、Pb2+、Zn2+ 等． 酶标记电流型免疫传感器 原理：主要是竞争法和夹心法 竞争法是用酶标抗原与样品中的抗原竞争结合电极上的抗体，催化氧化还原反应，产生电