猪去氧胆酸与鹅去氧胆酸的提取纯化工艺.PDF

亿 学与生 物 互程 2013，Vo1．30No．8 囫 Chemistry Bioengineering doi：10．3969／j．issn．1672—5425．2013．08．018 猪去氧胆酸与鹅去氧胆酸的提取纯化工艺 张 飞。赵静国，赵蒙浩 、 一 (武汉轻工大学生物与制药工程学院，湖北 武汉 430023) 摘 要：从提取胆红素后的猪胆粉中同时提取猪去氧胆酸与鹅去氧胆酸。将猪胆粉皂化制得混合猪胆汁酸粗品，在 浓盐酸催化下形成 甲酯，猪去氧胆酸 甲酯与 甲苯形成 的复合物不溶于甲苯而结晶析 出，蒸干 回收溶剂 ；用柱层析法，以乙 酸 乙酯一石油醚为洗脱剂分离鹅去氧胆酸 甲酯；最后经碱水解得到纯猪去氧胆酸与鹅去氧胆酸，纯度经 HPLC测定均 大于98 。该提取工艺能同时提取 出猪胆粉中的猪去氧胆酸与鹅去氧胆酸，步骤少、操作简单、原料利用充分。适合于 工业化生产 。 关键词：猪胆粉；猪去氧胆酸；鹅去氧胆酸；提取；纯化 中图分类号：TQ464．54 R284．2 文献标识码：A 文章编号：1672—5425(2013)08--0067—03 猪胆汁酸是猪胆汁的主要成分，约 占猪胆汁总量 1 实验 的5O ～7O ，主要有猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、猪胆 酸等，其中猪去氧胆酸约占4O 、鹅去氧胆酸约 占 1．1 材料、试剂与仪器 25 。猪去氧胆酸具有降血脂、镇痉、祛痰等作用，为 猪胆粉，上海长城药业有限公司。 人工牛磺的重要成分，临床上可用于治疗高血脂症、气 柱层析硅胶、薄层硅胶板，青岛海浪硅胶干燥剂 管炎以及由肝胆疾病引起的消化不 良，对百 日咳菌、白 厂 。 喉杆菌、金黄色葡萄球菌亦有抑制作用[1]。周维善 除HPLC所用试剂为色谱纯外，其余试剂均为分 等[2]还以猪去氧胆酸为原料，合成了具有生理活性的 析纯。 YRT一3型熔点仪，天津大学精密仪器厂；Mercury 甾体物质。鹅去氧胆酸在临床上不仅用作溶解胆固醇 Plus一400型核磁共振氢谱仪，美 国Varian公司；戴安 类结石和纠正饱和胆汁的药物，还具有显著的平喘、抗 P680型高效液相色谱仪-GraceDavisonDiscovery 炎、镇咳和祛痰等作用。鹅去氧胆酸也是昂贵的熊去 SciencesCl8色谱柱(4．6mm×250ram)，以乙腈一磷 氧胆酸的合成原料，它们都是治疗胆道疾病的有效药 酸盐(50：50)缓冲溶液为流动相，检测波长为 210 物3【]。目前人们主要利用猪胆汁提取猪去氧胆酸或鹅 nm]；戴安UVDI70U型检测器。 去氧胆酸，猪去氧胆酸主要用大量 乙酸乙酯进行提 I．2 方法 取[4]，乙酸乙酯提取物经丙酮重结晶、甲醇(乙醇)一水 1．2．1 混合猪胆汁酸粗品制备 重结晶或直接用柱层析[1进行纯化，这几种方法不仅 在 2L圆底烧瓶 中加入猪胆粉 100g、10 氢氧化 溶剂消耗量大，产品纯度也低 。鹅去氧胆酸的提取方 钠溶液 1000mL，加热回流 20h，皂化完全后，静置冷 法主要有钡盐沉淀法[引、钙盐沉淀法[、离子交换树脂 却至室