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.2动物细胞融合与单克隆抗体
细胞融合技术 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法也类似,常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。 动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。 动物细胞融合 细胞融合与融合诱导细胞融合物质 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 二、单克隆抗体 效应B淋巴细胞与抗体 单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体? 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 * * * * * 2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 龙江一中 李启国 一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 诱导剂:仙台病毒 聚乙二醇 电融合 诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。 制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 什么是抗体? 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 效应B淋巴细胞产生抗体。 1.效应B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。 2.动物体内的效应B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 3.每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 由单个效应B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点: 特异性强、灵敏度高 单克隆抗体制备过程 注射抗原 效应B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选,继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 思考: 1、本过程利用了哪些原理? 免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合? 这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体的能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体 单克隆抗体的应用 单克隆抗体的主要优点在于它的特异性强,灵敏度高,并可能大量制备。 单克隆抗体在诊断的应用上,具有准确、高效、简易、快速的优点 1、作为诊断试剂 2、用于治疗疾病和运载药物 疗效高、毒副作用小的新型药物--“生物导弹” 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比,单克隆抗体产量高,特异性强,灵敏度高,优越性十分明显。 应用主要有: 1、临床诊断 2、作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”治疗肿瘤 资料:目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病,用单克隆抗体作为诊断手段,是一个必然趋势。另外,用单克隆抗体做体内诊断,借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意,目前,主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。 * * *
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