细胞操作技术与柑橘遗传改良.pdfVIP

统一的国内外大市场、大流通2间的矛盾，咀便更好地适应八世后产业形势发展的需要。 3．2优化区域布局，改善品种结构 我国的苹果生产区域分布广阔，主要产区既有苹果栽培的适宜区，也有次适宜区和不适宜区-从 产业发展的大局山发，苹果生产应逐渐向优势区集中，在增加对优势区苹果产业扶植力度的同时，鼓 励非适宜区尽快凋整种植结构，改种其他适宜树种或其他作物。在适宜区内，充分利用荒山、荒坡、 荒滩大力发展适宜品种。要加快老劣果园的淘汰与更新，进一步调整品种结构，适当控制老品种的栽 植面积，积极发展优新品种鲜食品种和加工专用品种，同时注重早、中、晚熟品种的搭配。 3．3依靠科技，提高果品质量 苹果质量的竞争，实际上就是科技的竞争。采用良种壮苗、高接换种、控冠改形、疏花疏果、配 方施肥、人工或壁蜂授粉、果园覆盖(秸杆、塑膜)、生草栽培、节水灌溉、病虫综合防治、果实套 袋、摘叫转果、铺反光膜等技术，最大限度提高果实品质。此外，强化科技培训和推广力度，提高果 农科技素质，实行果树规范化管理，生产山合乎市场要求的果品。 3，4建立出口基地，参与国际竞争 要按照高标准、高科技、高投入、高效益的原则，在苹果生产最适宜区建立优质苹果生产和出口 基地，完善林、渠、路等配套设施，推行生草制和覆盖制，重视病虫害综防技术，合理选择农药，加 强生物防治．尽量减少化学农药和生长调节齐的使用，生产无公害果品或绿色果品。同时加强采后商 品化处理设施建设，提高贮藏、加工能力。制定与国际接轨的苹果质量标准、产地环境标准和与之相 适应的栽培技术规程，实旆粟品标准化生产。逐步建立健全果品质量监督检测体系，严把质量关，依 靠质量赢得国际市场的信誉和市场竞争力。 细胞操作技术与柑橘遗传改良 郭文武蔡小东段艳欣刘歆邓秀新 3007 (华中农业大学因艺林学学院，作物遗传改良国家重点实验室，武汉4 0) 植物细胞操作等生物技术手段在柑橘育种实践中具有重要的意义和很好的应州前景。在以前的基 础上，近年我们进一步开展了有关研究，现总结如下。 1、柑橘转化体系优化及相关目的基因的转化植株再生 高效的转化再生体系是柑橘分子育种研究的基础平台。近年，我们建立起适合柑橘不同品种的外 植体转化再生体系。1)以柑橘胚性愈伤组织原生质体为转化受体．以GFP(绿色荧光蛋白)为选择标 记，采用PEG介导法，进行了柑橘抗溃疡病候选基因(共转化法)的转化研究，获得纽荷尔脐橙、默 卡橘橙、哈姆林甜橙、早金甜橙(均为抗溃疡病候选基因)以及伏令夏橙(果胶甲脂酶PME基闵)等 5个品种的转基因植株。2)以胚性愈伤组织为转化受体，获得多个品种的转GFP基因细胞系和一批植 株，为相关研究奠定了材料基础。3)以实生苗上胚轴为受体，对横切、纵切、斜切这三种切口方式的 比较表明，斜切的效果最好，切口处再生芽的数量和质量都较好；在此基础上，获得GFP、LFY、APl、 诱导果实无核(RNase酶)等基因的转化植株。目前，一大批植株已移入温室，正在进行分子检测等 研究。 国家自然科学基金、教育部新世纪优秀人才支持计划、霍英东青年教师基金、湖北省杰Ⅲ青年基每、瑞典国际科学基 金等项目资助。Email：guoww@mailhzau．edu．011 196 2、柑橘体细胞杂种的再生优势：转GFP基因用于细胞融合所揭示的直观证据 以前的经验表明，柑橘等植物体细胞杂种具有再生优势现象，但该现象一商缺乏直观的实验证据的 证实。我们在获得转GFP(绿色荧光蛋白)基因植株的基础上，以”愈伤组织原生质体+转GFP基因 叶肉原生质体”的实验模式，利用柑橘叶肉原生质体不能分化再生和GFP荧光只在杂种细胞表达的特 点，对杂种细胞分化再生的全过程进行活体筛选和跟踪，即在融合产物培养再生的早期愈伤组织和胚 状体等阶段，根据GFP绿色荧光表达与否，将杂种细胞系、胚状体与胚性愈伤组织亲本再生类型活体 分离(注：柑橘叶肉原生质体不能分裂再生)并进一步培养，这极大地提高了细胞融合再生效率。而 且，这有利于对植物细胞融合再生过程中的有关理论问题进行探讨，如杂种的竞争优势、体细胞胚胎 发生能力、胞质杂种再生机理等。通过GFP表达与否、亲本与杂种再生状况、GFP表达强弱与杂种倍 性的关系等的统计比较，对有关理论问题的研究很容易进行。通过跟踪再