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苹果果实中细胞质型苹果酸脱氢酶cyMDH的克隆与表达分析.pdf
果树
苹果果实中细胞质型苹果酸脱氢酶
(cyMDH)的克隆与表达分析
姚玉新1李明1刘 志2 翟衡1
(1山东农业大学园艺种学与工程学院，泰安271018；
2辽宁省果树科学研究所，熊岳115214)
r摘要：苹果酸脱氢酶(MDH)广泛存在于动、植物和微生物中，主要负责催化草酰乙
酸和苹果酸的相互转化。根据亚细胞定位苹果酸脱氢酶可分为五种类型，其中依赖于NAD的
细胞质型苹果酸脱氢酶目前在植物上的研究比较少，．eyMDH作为苹果酸代谢的关键酶之一，
其转录水平与苹果果实酸度的关系在苹果上目前未有报道。本研究从苹果果实中分离了cyM—
有一个996bp的ORF，并且基因组序列分析表明该基因含有6个内含子。序列同源性分析表
中可能存在三个拷贝。RNA杂交表明MabcyMDH在苹果的不同组织中呈现不同的转录水平，
其中在根中的转录水平最低；高酸和低酸果实中Mal—cyMDH表现出相同的表达模式，都随着
果实的发育转录量逐渐增加直到趋于平稳；高酸和低酸个体之间的转录水平没有明显的差异。
domestica
关键词：苹果(Malus B．)；细胞质型苹果酸脱氢酶；cDNA克隆；DNA和
RNA杂交
Abstract：Malate existsin and thein—
dehydrogenase(MDH)ubiquitouslyplantscatalyzes
to MDH
terconversionfromoxaloacetate
malate．CytosolieNAndependentgene(cyMDH)en—
codesa erueialformalieacid inthe hasnotbeenexten—
keyenzyme synthesiscytosol，which
characterizedin this eDNAof wasisolatedfrom
sively plants．Instudy，afulMengthcyMDH
as 3rand ofeDNAends，and
fruitswithRT-PCRweltas
apple 5’rapidamplification designated
containeda ORF six
as accessionNo．DQ221207)．It with
Mal-cyMDH(GeneBank 996一bp
a
intronsinits showed toother
genomicsequence．Sequenceanalysis highsimilarityplantcyM-
DHs．DNA of in
gel—blotanalysessuggested·threecopies MabcyMDHapple
indicatedit intissues
gel-blothybridi
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