4-3饲料中粗蛋白的测定.pptVIP

三、蛋白质含量测定的其它方法（直接法） （三）紫外吸收法 1．原理 蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。 此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。 * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. * * 4.3 饲料中粗蛋白的测定 蛋白质是畜禽日粮中最主要的物质之一，蛋白质是生命的物质基础。测定饲料中蛋白质的含量，对于初步评价饲料的营养价值、合理开发利用饲料蛋白资源、提高产品质量、优化饲料配方、指导经济核算及生产过程控制均具有极重要的意义。饲料中蛋白质的检测十分重要！ * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、蛋白质的测定方法 1．直接法 根据蛋白质的物理、化学性质直接测定蛋白质含量。 双缩脲法 Folin—酚试剂法（Lowry法） 紫外吸收法（最常见的280nm） 考马斯亮兰法（Bradford法）－染料结合法 * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、蛋白质的测定方法 2．间接法 通过测定样品中总含氮量推算蛋白质含量（根据：每种蛋白质的含氮量是恒定的，N×6.25）。 凯氏定氮法（Kjeldahl）8~9小时 杜马斯燃烧定氮法（Dumas Combustion Method） —900℃~1200℃高温燃烧，燃烧过程中产生混合气体，其中的干扰成分被一系列适当的吸收剂所吸收，混合气体中的氮氧化物被全部还原成分子氮，随后氮的含量被热导检测器检测。3～5 分钟 强碱直接蒸馏法 —样品在强碱溶液中消煮，使蛋白质中的不稳定氮素以氨的形式释放出来，在 一定条件下，所释放的氨和样品中的含氮量成正比且有很好的相关性，建立 不稳定氮量与全氮量之间的回归方程。 ～20分钟 纳氏试剂比色法 * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、凯氏定氮法测定粗蛋白含量 19世纪（1883）建立的经典方法，结果可靠（最常用的标准方法），凯氏定氮法由于具有测定总有机氮量准确度高，可测定各种不同形态样品等两大优点，因而被公认为是测定食品、饲料、种子、生物制品、药品中蛋白质含量的标准分析方法。 但操作费时（8～9 h）——改良方法：加催化剂加快分析速度、仪器改进（自动、半自动凯氏定氮仪）。 * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、凯氏定氮法测定粗蛋白含量 1. 原理 各种饲料的有机物质在还原性催化剂（如CuSO4，K2SO4或Na2SO4或Se粉）的帮助下，用浓硫酸进行消化作用，使蛋白质和其它有机态氮（如氨基酸、酰胺、核酸，在一定处理下也包括硝酸态氨）都转变成NH4+并与H2SO4化合成（NH4）2SO4，而非含氮物质，则以CO2↑，H2O↑，SO2↑状态逸出。然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。 * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、凯氏定氮法测定粗蛋白含量 1. 原理