实用细胞培养技术1讲述.pptVIP

实用细胞培养技术 袁广卿  ◆ 在细胞培养中注意的一些问题 ◆ 细胞培养的实验程序 ◆ 细胞的复苏 ◆ 细胞的计数 ◆ 细胞(贴壁)的传代培养? ◆ 细胞的冻存 ◆ 悬浮细胞的培养方法 在细胞培养中注意的一些问题 环 境 由于体外培养细胞没有抗感染能力，即便使用设备完善的实验 室，若实验者粗心大意，技术操作不规范，也会导致污染。因而， 每一项工作都必须做到有条不紊和完全可靠，特别是实验环境更为 重要。 1. 培养室和超净台的消毒 无菌培养室每天都要用0.2％的新洁而灭（苯扎溴铵）拖洗地面 一次（拖布要专用），紫外线照射消毒30－50min，超净工作台台 面每次实验前要用 75％酒精擦洗，然后紫外线消毒 30 min。在工 作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线，消毒时 工作台面上用品不要过多或重叠放置，否则会遮挡射线，降低消毒 效果。一些操作用具如移液器、废液缸。污物盒、试管架等用75％ 酒精擦洗后置于台内同时紫外线照射消毒。 2. 培养前准备 在开始实验前要制定好实验计划和操作程序，有关数据的计算 要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误