动物细胞培养技术精要.ppt

动物细胞培养技术 1.动物细胞的生长与培养 动物细胞的特点 进化程度高 结构、形态、成分复杂 细胞间连接形式多样 生长相对缓慢 功能全面 1.2 细胞培养总原则 (一) 细胞培养无菌无毒环境 实验室设计合理 常用设施及设备 培养器皿： 透明度好、无毒、利于细胞贴附和生长的材料，常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。 细胞培养无菌操作基本技术 工作环境及表面的处理 细胞培养所用玻璃及塑料制品的处理 培养液与培养细胞的处理 (二) 细胞的营养 培养基：合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。 血清：血清是细胞培养液中最重要的成分之一，含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分 。 其它成分（条件培养基） 合成培养基的主要成分 氨基酸 碳水化合物 无机盐 维生素 其它辅助物质 血清 牛血清、马血清、人血清 （1）储存于-20℃ — - 70℃ 低温冰箱中 （2）一般厂商提供的血清为无菌 （3）热灭活是指56℃, 30 分钟加热已完全解冻的血清，目的是使血清中的补体成分（complement）灭活 （4）血清中的沉淀物絮状物，可用离心3000rpm, 5 分钟去除，也可不用处理。 其它常用液体试剂 Hank’s D-Hank’s PBS NaHCO3（ 7.5%