阿魏侧耳单孢菌株杂交子特性研究.pdfVIP

24卷 肖美丽等：阿魏侧耳单孢菌株杂交子特性研究 157 阿魏侧耳单孢菌株杂交子特性研究 肖美丽· 王卓仁1 刘洲军· 刘世玲2 李克彬2 边银丙p (-华中农业大学应用真菌研究所武汉4300／0 2宜昌市徽生物研究所湖北宜昌433000) 摘要：采用形态特征和农艺性状具明显差异的阿魏倜耳(Pleurotus^emlae)个栽培菌株(A双和B双)进行 单孢配对杂交，随机选择5个杂交予进行拮抗试验、菌丝生长特性、子实体形态及产量性状的研究。在4个出 菇的杂交子中。子实体各个部位的色泽均介于两个亲本之间．菌盖和菌柄形态与亲本A双更相似。通常杂交 子的菌盖直径小于两个亲本。菌柄长度和单朵重量介于两个亲本之间。杂交子4242每个菌袋的子实体产量 高于所有其它供试菌株。是杂交子中表现最优的菌株。部分菌袋和个别杂交子不出菇的原因，可能与栽培条 件有关．但也可能是由于核变异或遗传不稳定性所导致。 关■词：阿魏倜耳杂交代料栽培拮抗反应农艺性状 阿魏侧耳(Pleumtus屈亿E刎又名阿魏菇，是原产于新疆干旱草原上的野生食用菌，菇盏厚嫩，甘醇可 1：1，能消积，杀虫，镇咳。消炎，治疗腹部肿块，肝脾肿大，脘腹冷痛及治疗妇科肿瘤等症，还可以提高人体 免疫力11一。通常抗逆性强，生长速度慢，喜低温，产量低，但不同菌株之间在形态特征、生物学特性和农艺 性状上均存在差异【31。通过种内杂交获得抗性强，农艺性状好，产量高的优良菌株，对生产实践有重要的 现实意义。 1材料和方法 1．1供试菌株 阿魏侧耳(Pleurotus f踟lae)供试菌株A双来自福建三明真菌研究所。菌株B双来自北京金信食用菌有 限公司．原名白阿魏侧耳。两个菌株均为华中农业大学菌种实验中心保藏。 1．2试验方法 1．2．1单核菌株分离 取菇形较好九分成熟的子实体，用孢子弹射法收集担孢子。经梯度稀释分离后涂布平板嗍，25℃培养 8d后挑取单核菌落于试管培养，然后将培养所得菌丝挑取少许接入平板，插片。镜检观察锁状联合有无， 鉴定并获得来自A双的19个单核菌株和来自B疆的18个单核菌株。 表1．单核菌株配对组合及其杂交菌株编号 1．2．2单核菌株杂交 将来自A飙和B取的单核菌株分别编为九M和B“，各分为3个组，每组60个菌株(m≤6或7，rl≤ 3)。挑取A。单核菌株米粒大小的菌丝块接人平板中央，再挑取B双单核菌株菌丝块接人同一平板，两者相 距约l厘米，并将灭菌的盖玻片插于两菌丝块之问。25℃培养12d，取盖玻片镜检，将有锁状联合的交接 部分菌丝接人平板上培养备用嘲。在所有的杂交配对中随机选取5个杂交菌株(表1)供进一步试验。将供 试菌株两两组合接到平板培养基上，共有28个组合。培养后观察是否产生拮抗线。 1．2．3代料栽培 参照参考文献的方法进行配料、装袋、灭菌、发菌和出菇管理删，8月25日制作栽培种，10月28日 接种袋料进行栽培，3月28日始见幼小菇蕾。对照亲本B疆和A取及供试杂交子分别接种21-22袋。出菇 前解开菌袋口，将菌袋底部约1／3的塑料膜剪去。分层摆放。每层问都覆盖少量泥土用以保湿。每个供试 菌株挑选未受污染的12个菌袋。分3个小区随机摆放出菇。 1．2．4培养特性与农艺性状观察 菌丝生长速度测定采用常规的平板培养，测定菌落直径，每个供试菌株各3次重复。栽培料中菌丝生 ·本文联系作者 158 菌物学报 24卷 ———●———_—————————————————————————————————_————-———_———————_—_—————————————————————————————————————————————————————一一—— 长速度测定。待移茵袋袋口截面长满菌丝后，以袋1：3截面为起点，每2天测量菌丝向菌袋底部延伸的长 度。 采收成熟的子实体，称取单个子实体的重量；测量菌盖直径和厚度，菌柄长度和直径；收集孢子印， 用挑针挑取担孢子制作临时玻片，在显微镜下观察。记录担孢子大小、形态及有无内含物。 2结果和分析 2．1杂交菌株的鉴定 图1．单核菌丝隔膜(10×100) 图2．双核菌丝锁状联合(10xlOO) 来自A飙和B双的单核菌株之间所有的配对菌丝之问都能融合，没有出现拮抗现象，能产生具锁状联 合的双核菌丝。 2．2培养特性 从表2可以看出，杂交菌株4241在完全培养基中生长速度最快，与生长最慢的亲本菌株A。之间存 在显著差异，但与其它杂交菌株和亲本菌株B双之问不存在显著差异。在PDA培养基上杂交菌株2121和 亲本菌株B双的生长速度最快，其次是杂交菌株4242。而在袋装培养料中．杂交菌株3131菌株生长速度 最快，其次是菌株5151，它们的生长速度均较两个亲本快，而杂交菌株2121生长最慢。 表2供试菌株在不同培养基上的生长速度(cn删) 2．3掊抗反应试验结