阿维菌素类农药净化处理及检验分析现状.pdfVIP

公共安全化学研究论丛 阿维菌素类农药净化处理及检验分析现状 杨 挺h 于忠山2 王 炯2 1中国人民公安大学，北京，100038 2公安部物证鉴定中心，北京，100038 +E-mail·ycyt0419@sina．eom 摘要本文介绍了国内外目前在研究阿维菌素类农药时所采用的各种净化处理和检 验分析方法，并对各种方法的优缺点进行了阐述。针对时下各种方法无法满足案件检验工作 需求的现状，提出了建立一套紧密适用于公安检验工作的分析方法的建议。 关键词阿维菌素；提纯净化；检验分析。 1概述 阿维菌素(Avennectin，简称AVM)又名爱比菌索、阿巴美丁，是从阿佛曼菌发酵的代 谢产物中提取的一种安全、高效、广谱的新型大环内酯类抗寄生虫药，对植物的寄生线虫 和体外节肢动物有较强的驱杀作用，是目前应用最广泛的抗寄生虫药物。 近期国内发生了多起阿维菌素中毒案件，但由于针对该类毒物检验的公安领域内的 研究仍处于空白阶段，这也给案件的侦查工作带来了很大的难度。随着该类农药的推广 使用，因其而导致的中毒案件也必将不断增多。因此，公安机关对该类农药中毒案件的检 验需求也日趋迫切。 目前国内外文献中所涉及的阿维菌素检验主要集中于农药在农作物表面、生物体内 (包括家畜、昆虫)以及土壤，水质中的残留情况及效用分析。下面就对现阶段国内外常 使用的阿维菌素提取净化以及检验方法作一个概述： 2提纯净化 2．1 自制层析柱净化法 柱层析净化是把固定相的吸附剂，如离子交换树脂、氧化铝、硅胶等装入柱内，然后在 柱顶滴人要分离的样品溶液，使它们首先吸附在柱的上端形成一个环带。当样品完全加 入后，再选适当的洗脱液(流动相)进行洗脱，从而达到分离净化的效果。1999年莫云、 朱蓓蕾等人在文献《兔组织中阿维菌素残留的高效液相色谱测定》中介绍通过自制层析 柱对阿维菌素进行净化，制法如下： 2．1．1硅胶柱：首先在5mL玻璃注射器的底部垫两层滤纸，依次加入1．29无水硫 酸钠、29硅胶(含水15％)和1．29无水硫酸钠，边加边用洗耳球的尖嘴将柱内物敲实。 然后分别用5mL甲醇和二氯甲烷淋洗，备用。 2．1．2氧化铝柱：首先在5mL玻璃注射器的底部垫两层滤纸，依次加人2．49无水 268 阿维菌素类农药净化处理及检验分析现状 硫酸钠和29氧化铝(含水4％)，边加边用洗耳球的尖嘴将柱内物敲实。然后分别用 5mL甲醇、二氯甲烷和2mL乙腈淋洗，备用。之后将处理好的组织匀浆通过层析柱，并 以乙腈作为洗脱液多次淋洗层析柱进行提纯净化。但是，用此方法处理样品时，由于固定 相颗粒来源不同，批号不同，同类填料的理化性能会有大的差异，加上活化方法和填充方 式因人而异，所以样品制备与前处理结果的重现性与可比性均较差。 2．2固相萃取法(SPE) 在国内外有关阿维菌素检验的文献中多次提到用c．。柱或碱性氧化铝柱作固相萃取 柱，或者二者混合使用，并以乙腈作为洗脱液多次淋洗萃取柱进行提纯净化。该方法的优 点是操作简便，处理样品速度快，萃取回收率高，不会像液液萃取可能出现分离不完全甚 至出现乳化、回收率较低等现象，而且不会产生大量的有机废液。适用于生物体内的农药 残留物的提取净化。 2．3免疫亲和色谱净化法(IAC) 1997年李俊锁、张士勤等人在文献《绵羊血清中阿维菌素的高效液相色谱法测定》中 介绍用结合物4”一0一(单)琥珀酰阿维菌素一BSA(牛血清白蛋白)免疫新西兰白兔， 制备和分离特异性针对阿维菌素的多克隆抗体(IgG)。将抗体与溴化氰(CNBr)活化的 珠状琼脂糖(Sepharose 4B)偶联，制得免疫亲合吸附剂。净化时，取生物检材与含甲醇 的PBS(磷酸盐缓冲溶液)混合，加样，在蠕动泵推动下，混合液以一定流速通过IAC柱； 之后，以含一定量甲醇的PBS和含一定量甲醇的水溶液依次洗涤IAC柱，收集洗脱液。 本方法最显著的特点是操作十分简单，速度快，灵敏度相当，样品回收亦相当完全。样 本仅需“加样一洗涤一洗脱”一次层析即可用HPLC进行测定，避免了样本的反复萃取和 浓缩，回收率高；水相操作(这里仅使用甲醇和PBS)，避免了大量有机溶剂的使用，分析 费用低，减少了对环境的污染。这些均得益于IAC的高度选择性和高效性，是单纯常规 理化分析技术难以达到的。 2．4超临界萃取净化法(SFE) 2001年Martin Danaher，Michael O’Keeffe等人在文献“Extraction and isolation of aver— mectins and milbemyeins from liver samples using unmodified supereritieal C02 with in—line trapping on basic alumina”中提到用超临界萃取对阿维菌