阿魏酸异辛酯抑制酪氨酸酶活性的动力学研究.pdfVIP

生物工程 食品研究与羿发 Food Research And DeveloIoment 2013年 1月 第34卷第1期 iol = =I 阿魏酸异辛酯抑制酪氨酸酶活性的动力学研究 龚盛昭，尹美娟 ，邰晓曦，云智勉 (广东轻工职业技术学院精细化工技术研发中心，广东 广州510300) 摘 要：在 30℃，pH=6．8的 Na HPO4-NaH2PO 缓冲体系中，采用酶动力学方法研究阿魏酸异辛酯对酪氨酸酶单酚酶 和二酚酶活力的抑制动力学。实验结果表明，阿魏酸异辛酯对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有良好抑制作用，对单 酚酶和二酚酶活力的相对抑制率达到 50％的阿魏酸异辛酯浓度(ic )约分别为 0．24mmo~L和 O．45mmol／L，比熊果 苷抑制二酚酶活性的，c 值 5．3 mmo~L小得 多。阿魏酸异辛酯能明显延长单酚酶的迟滞时间，0．4 mmol／L阿魏酸异辛 酯能使迟滞时间由 1．1 min延长至 3．6 rain。Lineweaver—Burk图显示阿魏酸异辛酯对二酚酶的抑制作用表现为竞争性 抑制，抑制常数( )为 0．20 mmol／L。 关键词：夏酪氨酸酶；阿魏酸异辛酯；抑制作用；动力学；单酚酶；二酚酶 Inhibitory Kinetics of 2一Ethylhexy Ferulate on Tyrosinase-catalyzing Reaction GONG Sheng—zhao，YIN Mei-juan，TAI Xiao-xi，YUN Zhi—mian (Research Centre ofFine Chemical Technique，Guangdong Industry Technical Colege，Guangzhou 510300， Guangdong，China) Abstract：The inhibitory kinetics of 2-ethylhexy ferulate on the activity of monophenolase and diphenolase contained in tyrosinase was studied by enzymological kinetic method with Na2HPO4一NaH2P04 bufer solution (pH=6．8)at 30 oC．2-ethylhexy ferulate was found to inhibit the monophenolase and diphenolase activity of tyrosinase wel1．The 2-ethylhexy ferulate concentrations leading to 50％ inhibitory rate(，C卯)were 0．24 mmol／L f0r monophenolase and 0．45 mmol／L for diphenolase，much less than that of arbutin (IC5o=5．3 mmol／L for diphenolase activity)．2一ethylhexy ferulate can extend the lag time of tyrosinase for oxidation of L—tyrosine， 0．4 mmol／L of 2-ethylhexy ferulate resulted in the extension of lag time from 1．1 rain to 3．6 rain．The inhibition kinetics of 2-ethylhexy ferulate analyzed by Lineweaver-Burk plots demonstrated a competitive inhibitor for the oxidation of L—DOPA，the inhibition constant for inhibitor binding with enzyme，K1 was determined to be 0．20 mmol／L． Key words：tyrosinase；2-ethylhexy ferulate；inhibitory effect；kinetics；monophenolase；diphenolase 酪氨酸酶(EC 1．14．18．1)又称多酚氧化酶，广泛存 在于动植物体和人体内，是生物体合成黑色素的关键 酶【 ，也是昆虫变态发育和免疫中的重要酶。酪氨酸酶 在食品酶促褐变反应中起重要作用，酪氨酸酶是一种 含铜的金属酶，每一个亚基含两个金属铜离子，两个铜 离子分别与蛋白质分子中组氨酸结合，另有一个内源 桥