阿胶中特异性多肽的分离与液质联用分析.pdfVIP

第27卷增刊 2006年7月 质谱学报 Journal of Chinese Mass Spectrometry Society 阿胶中特异性多肽的分离与液质联用分析 刘 涛，张贵锋，孟庆强，马光辉，苏志国 (中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室，北京100080) V01．27 Suppl． Jul．2006 Separation of the Unique Peptides from Colla Corri Asini and Sequence Determination with High Performance Liquid Chromatography‘Mass Spectrometry LIU Tao，ZHANG Gui—feng，MENG Qing—qiang，MA Guang—hui，SU Zhi—guo’ (State Key Laboratory of Biochemical Engineering，Institute of Process Engineering。Chinese Academy of Sciences，Beijing 100080，China) Abstract：Colla corri asini，as traditional Chinese medicine“Ejiao”，iS a kind of donkey-skin gelatin．The main components in Colla corri asini include proteins，peptides，polysaccha- rides and amino acids．In this study，the Ejiao solution was fractionated by fibronectin—seph- ，arose affinity chromatography．After further demineralization and condensation by solid- phase extraction，some unique peptides were obtained．The peptides obtained were separated with high performance liquid chromatography and their sequences were determined with elec- trospray ionization mass spectrometry． Key words：Ejiao；fibronectin；peptide；chromatography；mass spectra 中图分类号：0657．63 文献标识码：A 文章编号：1004—2997(2006)增刊一181—02 阿胶(Colla corri asini)是我国的一种传统 中药，是由驴皮经煎煮浓缩制成的固体胶，其主 要成分为蛋白质和多肽类物质、多糖类物质及其 它小分子物质。阿胶的主要功能包括补血、免疫 功能调节、抗休克、促进淋巴细胞转化及改善钙 代谢等，但作用机理并不十分明确。近年来，关 于胶原蛋白及明胶中的活性多肽的相关研究逐 步成为研究热点。阿胶中蛋白质和多肽类物质 含量占阿胶物质含量的80％以上，主要来自于 驴皮胶原蛋白的降解。对阿胶中潜在的特异性 多肽进行识别，有助于对阿胶中有效成分的识 别，推动阿胶产品的深度开发及剂型改善。 纤维连接蛋白具有多方面的生理功能，如： 参与细胞与细胞、细胞与基质之间的粘连，维持 细胞正常形态，保持微血管完整性，形成利于细 胞运动的暂时性基质，促进细胞分化，参与伤口 基金项目：国家自然科学基金(NoNo 作者简介：刘涛(1981～)，男(汉族)，湖南人，硕博连读研究生，蛋白质药物与质谱分析方向．E-mail：liutao@home．ipe．8e．en ’通讯作者：苏志国(1954～)，男(汉族)，辽宁人。研究员、博士生导师，蛋白质相关技术研究．E—mail：zgsu@home．ipe．ac．ca 182 质谱学报 第27卷 的愈合，阻止肿瘤细胞转移，提高网状内皮系统 防御功能，调理单核巨噬细胞吞噬外来抗原，并 能促进机体清除血中有害物质，包括免疫复合 物、损伤的血小板、凝血产物、肿瘤细胞等，纤维 连接蛋白在提高机体防病抗病中起到重要作用。 为此，本研究利用亲和色谱法，从阿胶中分离得 到了能与纤维连接蛋白结合的特异性多肽，并用 液相色谱一质谱联用法对所得到多肽进行了分 析。 首先利用自制琼脂糖凝胶介质，制备了纤维 连接蛋白琼脂糖凝胶亲和色谱柱。将1 mg／mL 纤维连接蛋白溶液(缓冲体系：20 mM PBS，1