黄芪多糖提取工艺的研究.pdf

ofthe10th of Branch,ChineseAssociationofAnimalandVeterinaryScience ProceedingsSymposiumBiological 黄芪多糖提取工艺的研究+ 王洪礼1，王 燕1，李尚波1，杜绍范2，杨丹3 [摘要]本试验采用3因子3水平研究不同条件对提取黄芪多糖影响。结果表明，提取黄芪多糖的最佳工艺为：用12 倍的水煎煮3次，每次O．5h，煎煮液浓缩后用浓度为80％的乙醇，洗涤4次，再将沉淀物干燥。按照上述工艺制备的黄芪多糖， 收率可达到8．4％，纯度为51％。 [关键词]黄芪多糖；佐剂；水醇法 黄芪是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，是重要的益气中药，味甘，性温，有补气升阳，固表止汗， 托毒排脓，利水消肿和生肌等功效。现代医学研究发现其能增强机体免疫功能、增强细胞代谢、调节DNA复 制及RNA和蛋白质的合成、固肾降压、保肝抗炎的功能。黄芪多糖是黄芪的主要活性成分之一，在医学和兽 医I临床上研究应用也较广泛，可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗辅射、抗应 激、抗氧化等作用，但由于提取黄芪多糖的工艺比较复杂，致使黄芪多糖的成本很高，限制了黄芪多糖在兽医 临床上的应用，为此本实验采用传统的煎煮法和水提醇沉法，按照正交试验设计方案1摸索黄芪多糖的最佳 提取条件。 1材料和方法 1．1试验药品黄芪药材饮片，购于沈阳天益堂大药房；葡萄糖，北京奥博星生物技术责任有限公司生产， 批苯酚，上海试剂二厂，批号980425。 仪器厂生产。 1．3黄芪多糖分离条件的选择用正交试验设计的方法选择黄芪多糖的最佳分离条件，取中药材lOOg，加 10倍水，浸泡2h，加热煮沸30分钟，滤出药液，药渣再煮两次，合并滤液，滤液浓缩至lOOml，浓缩液摇匀后， 从中取出9份溶液，每份lOml，分装在9个大试管中。因分离多糖类成分的纯度与乙醇浓度和洗涤次数有 关，因而我们将乙醇浓度和洗涤次数作为考察的因子，结合相关文献每个因子选择三个水平，按二因子三水 平(见表1)做正交试验设计，安排9次试验(见表3)，在每份浓缩液中加入一定体积的95％浓度的乙醇，使 其最终浓度符合要求，并洗涤相应的次数，将沉淀物滤干，于100。C烘干至恒重，精密称量，计录，然后进行含 量测定。 1．4黄芪多糖煎煮条件的选择根据黄芪多糖的理化性质及中药材传统的提取经验，确定考察因素为煎煮 验方案见表5。 表1黄芪多糖分离工艺的因素及水平 表2黄芪多糖煎煮工艺的因素及水平 Table1 Factorandlevelof Table2 Factorlevelofdecoction separatetechnology and technology *作者简介：王洪礼(1973一)，男，硕士，执业药师，辽宁益康生物制品有限公司工程师，主要从事中药免疫与生物制品的研究工作。 ——200—— 中国畜牧兽医学会生物制品学分会第十次学术研讨会论文集 精确称取黄芪药材9份，每份样品重1009，依据表5的实验条件进行煎煮操作。将每份提取液分别滤 过、浓缩至100ml，按照2．1正交试验设计优化的黄芪多糖分离条件进行分离操作，干燥后称重，并测定每份 样品中黄芪多糖的含量。 1．5黄芪多糖的含量测定方法见参考文献2 2结果与分析 2．1优化黄芪多糖分离条件试验结果试验结果见表3，对表3结果进行统计学方法处理，得方差分析表， 见表4。 由表3中结果可以看出两种因素对黄芪多糖含量的影响关系为：AB，即乙醇浓度对黄芪多糖含量的 影响大于洗涤次数的影响，最佳提取工艺为A383。由表4可知，因素A对黄芪多糖的纯度有显著影响，而因 素B的影响不显著，实际生产中只需考虑乙醇浓度，洗涤次数可在4、5、6次中任选，因此可以确定黄芪多糖 的分离工艺为A381，即用80％乙醇洗涤4次。 表3正交试验设计优化黄芪多糖分离条件试验结果 Table3 Resultof conditionsthecontents