【全程复习方】（福建专用）版高中生物 1.1.1、1.2DNA重组技术的基本工具 基因工程的基本操作程序配套课件 新人教版选修3.pptVIP

答案：（1）目的基因 载体 同一种限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶的切割位点 （2）受精卵 显微注射技术 基因表达载体的构建 （3）检测到相应蛋白质 已患高血压 （4）胚胎移植 【互动探究】（1）如果把鼠换成植物，则导入受体细胞的常用方法改变吗？ 提示：变成农杆菌转化法。 分析：植物细胞与动物细胞具有不同的特点，导入的方法是根据操作的需要进行的，如利用农杆菌易感染植物的特性。 （2）分子水平检测除蛋白质检测外还有什么检测方法? 提示：DNA分子杂交、核酸分子杂交。 分析：利用DNA探针检测目的基因或相应的mRNA存在与否，说明目的基因是否存在或是否转录。 1.（2012·福州模拟）浙江大学农学院喻景权教授的课题组最新研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。研究人员发现，用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因(如P450和GsT)的表达和酶活性都得到提高，在这些基因的“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答： （1）获得油菜素内酯基因的方法有_____________（举二项即可）。第①步用PCR技术扩增基因时用到的耐高温的酶通常是指_____________。步骤②用到的酶有_____________。 （2）图中导入重组质粒的方法是______________。在导入之前 应用______________处理。 （3）导入重组质粒以后，往往还需要进行检测和筛选，可用 ______________制成探针，检测是否导入了重组基因；在培养 基中加入______________可将含有目的基因的细胞筛选出来。 （4）请你为该课题命名______________。 （5）请你说说该研究发现的生态学意义： _________________ __________________。 * 1.1、1.2 DNA重组技术的基本工具 基因工程的基本操作程序 一、基因工程的概念理解 1.供体：提供__________ 2.操作环境：______ 3.操作水平：__________ 4.原理：__________ 5.受体：表达目的基因 6.本质：性状在______体内表达 7.优点：克服_______________障碍，定向改造生物_____ 目的基因 体处 分子水平 基因重组 受体 远缘杂交不亲和 性状 二、DNA重组技术的基本工具 1.限制性核酸内切酶（简称：限制酶） （1）来源：主要从______生物中分离纯化出来。 （2）作用：识别特定的___________并切开相应两个核苷酸之 间的_____________。 （3）结果：产生__________或平末端。 2.DNA连接酶 （1）种类：按来源可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。 （2）作用：在两个核苷酸之间形成____________以连接_____ _________。 原核 核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 磷酸二酯键 两段 DNA片段 3.载体 （1）种类：_____、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 能__________ 有一个至多个________________ 有特殊的__________ 【点拨】提取目的基因和切割载体使用同一种限制酶，目的是 能形成相同的黏性末端，形成重组DNA分子。 质粒 自我复制 限制酶切割位点 标记基因 （2）质粒特点 三、基因工程的基本操作程序 1.目的基因的获取 （1）目的基因：编码蛋白质的______。 从_________中获取 （2）获取方法 利用_________扩增目的基因 通过__________用化学方法直接 人工合成 基因 基因文库 PCR技术 DNA合成仪 2.基因表达载体的构建——基因工程的核心 （1）由图可知载体的组成：_________、启动子、终止子、_____ _____。 （2）构建目的： ①使________在_________中稳定存在，并且可以遗传给下一代； ②使________能够表达和发挥作用。 目的基因 标记 基因 目的基因 目的基因 受体细胞 3.将目的基因导入受体细胞 （1）转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持___________的过程。 （2）常用方法 ： 导入植物细胞:_____________、基因枪法、花粉管通 道法 导入动物细胞:_____________ 导入微生物细胞:感受态细胞法（或Ca2+处理法） 稳定和表达 农杆菌转化法 显微注射技术 4.目的基因的检测