几种常见疾病的造模方法.docVIP

几种常见疾病的造模方法 1.血管性痴呆大鼠模型 动物选取 选用健康Ⅱ级SD雄性大鼠，体重280- 320 g，动物于安静环境下分笼饲养，室温控制在(22士1)℃的范围内，相对湿度60%，光线自动控制，明(07: 00- 19: 00)暗（19: 00-07）交替，给予充足清洁饮水、摄食。 处理 大鼠10%水合氯醛腹腔注射(1 g/ kg)麻醉后，将其仰卧固定。分离右颈总动脉（CCA） ,颈内动脉(ICA)及颈外动脉(ECA）并挂线备用，结扎ECA与CCA,用动脉夹夹闭ICA远心端后，迅速于ECA与ICA分义处作一切切口，从切口处插入一端加热成光滑球形尼龙线(直径为0. 25 mm,距球端2cm处作标记)。线插入ICA后，于入日处稍稍结扎尼龙线与入口处ICA段，然后松开夹闭ICA的动脉夹，继续插入尼龙线至稍有阻力后略回撤，至线插入深度为(18. 5士0. 5)mm左右，实现大脑中动脉阻塞导致脑缺血。再次结扎入口处，尼龙线外留约1 缝合皮肤。2h后轻轻提拉所留线头至有阻力，实现大脑中动脉再灌，则造模完成。 纳入 动物入选的标准(按照Zea Longa 5级评分法取评分为2,3,4分的动物,动物于缺血2h后出现对侧前肢倦曲或行走转圈或行走向对侧倒体征则纳入，动物无此体征或于缺血2h后仍不清醒者弃去。 2.大鼠酒精性肝病模型 取材 体重125- 155g雄性SD大鼠，环境温度18℃一20 0C,湿度70%左右，自由采食全价营养颗粒饲料，垫料为紫外线消毒后的卫生纸。 将酒精体积分数为0. 52的红星二锅头自酒(北京酿酒总厂生产)，按体积比分别稀释成400Io .450Io .500Io ( v/ v)备用。 处理 按每周所测得的体重给子每日早晚白酒灌胃各1次。第1周将稀释成40%的白酒按剂量 4g/(kg.d)、每次0. 5m1/ 100g灌胃，第2周按剂量8g/(kg.d)、每次1. 0ml/ 100g,灌胃，第5周开始将稀释成45%的自酒按9g/(kg.d),每次1. 0m1/ 100g灌胃，第9周将稀释成 50%的白酒按10g/（kg.d）、每次1. 0m1/ 100g灌胃，第11周起改用自由饮酒至第12周，以浓度50%白酒作为主要饮料，日供给量40ml，同时限制饮水。 纳入 弃去死亡的大鼠，即为模型大鼠。 3.肝郁脾虚证大鼠模型 取材 健康雄性SD大鼠，体重(230士10) g，SPF级，所有动物提前购入，适应性饲养3d, 5只/笼。光照节律12L: 12D(6 ：00~18：00),室温( 22士2) ℃，保持动物室安静。相对湿度保持3%一40%，喂常规颗粒饲料及饮用水。 处理 大鼠适应性饲养3d后进行初步筛选，将过于活跃和过于安静的大鼠排除,以慢性束缚方法制作慢性应激大鼠模型，束缚架自制(T型束缚台:底座宽10 cm,长20 cm,厚2 8 cm)上端束缚台长22 cm,最宽处66 cm,两侧分别有适合四肢放置的四槽及一条可调节的粘贴软带)，将大鼠束缚于束缚架上，两条粘贴软带分别固定大鼠的胸部和腹部，放入饲养箱中，每日3h,早8点到11点,连续21d,. 纳入 弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。 4.糖尿病大鼠模型 取材 健康SD大鼠60只，SPF级，雄性，体重190~ 230g. 大鼠预先饲养3d. 处理 造模前动物禁食16 h,按50 mg/ kg的剂量一次性快速腹腔注射0. 5%的链脲佐菌素。注射完后给食给水，2h后灌胃给予25%的葡萄糖水，防止大鼠低血糖的发生。于造模后第3天、第10天分别测定尿糖和空腹6h的血糖。尿糖阳性且空腹6h血糖≥16.7 mmol/ L者为糖尿病大鼠。 纳入 如上所述。 5.类风湿关节炎肾虚证大鼠模型 取材 选用6周龄无特殊病原体级SD大鼠，雌雄各半。正常饲料适应性喂养1周。 处理 去势法:按常规方法做去势手术，即摘除双侧卵巢与睾丸，术后28 d，取适量牛ll型胶原溶液(浓度为2 g/ L)逐滴加入至等容积的不完全弗氏佐剂中，牛1型胶原终浓度为1 g/ L; 冰浴中用匀浆器充分乳化以滴入水中不打扩散为度;取乳化后的混合物，按0. 2 mL/只，即200ug牛ll型胶原/只，于尾根部皮下注射;7d后按0. 1 mL/只，即100 ug牛11型胶原/只，于尾根部皮下加强免疫一次。 纳入 弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。 6.虚寒证大鼠模型 取材 SPF级雄性SD大鼠雌雄各半，体质量(240士10)g。 处理 以注射用氢化可的松琥珀酸钠( 20 mg/ kg)肌肉注射，每天1次，连续14 d。 纳入 弃去死亡大鼠，即为模型大鼠。 7.骨质疏松大鼠模型 取材 健康SPF级雄性SD大鼠，12月龄，体质量(330士10) g。室温19~23℃室内饲养，每日12h光照，定量给食，自