杨鸿玮--三聚氰胺毒理学特征及检测方法.docVIP

三聚氰胺毒理学特征及检测方法 摘要：目的 食品和饲料中三聚氰胺的毒理学研究及现阶段样品检测分析方法。总结食品和饲料中三聚氰胺的毒理学研究及现阶段样品检测分析方法。方法 目前主要的检测方法包括苦味酸沉淀法、升华法、电位滴定法、高效液相色谱法、气相色谱 － 质谱法、液相色谱 － 质谱法和酶联免疫法等。结果 实验证明长期摄取三聚氰胺可造人体多脏器损害。结论 三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环有机化合物。由于其较高的含氮量而被添加于食品和饲料中用以提高含氮量，对动物和人体造成了一定的危害。 关键词：毒理学; 检测方法; 三聚氰胺 1毒性研究 1． 1 急性毒性 三聚氰胺本身低毒，大鼠口服半数致死量为3248mg /kg，兔子腹腔注射半数致死量为 3200 mg / kg。该剂量与氯化钠的半数致死剂量非常接近 。Babayan 等人研究显示氰尿酸与三聚氰胺的综合毒性要大于三聚氰酸或三聚氰酸本身。对于大鼠和小鼠，氰尿酸三聚氰胺的半数致死量为4100 mg /kg( 灌胃) 或 3500 mg /kg( 吸入) ，而三聚氰胺为 6000 与 4300 mg /kg，氰尿酸为 7700 和 3400 mg /kg。 1． 2 长期毒性 长期摄取三聚氰胺可能造成生殖能力损害、膀胱炎、膀胱上皮样增生、膀胱或肾结石、膀胱癌、尿道恶性肿瘤等症状。三聚氰胺本身为低毒性，与三聚氰酸并用，会形成无法溶解的氰尿酸三聚氰胺，造成严重的肾结石。三聚氰胺进入人体消化道，会在胃酸的作用下部分转化为氰尿酸，与三聚氰胺形成微溶于水的结晶。经常饮水的成年人结晶易随尿液排出体外，但哺乳期婴儿饮水。较少且肾脏狭小，则较易形成结石美国食品药物管理局( FDA) 于 2007 年发布人体可容忍每日摄取量 ( Tolerable Daily Intake;TDI) 为 0． 63 毫克 / 每公斤体重 / 每天。2008 年， FDA 进一步把 TDI: 下修到 0． 063 毫克 / 每公斤体重 / 每天( 应对健康无害的摄取量) 。 2 检测方法 2． 1 工业检测方法 2． 1． 1 苦味酸法和升华法 工业三聚氰胺含量检测按照国家标准《工业三聚氰胺》( GB /T9567 － 1997) 采用苦味酸法和升华法进行测定。重量法在国家标准 ( GB /T9567 － 1988 ) 中出现，在 1997年修订版中予以删除。苦味酸法的原理为三聚氰胺与苦味酸可形成沉淀，由所生成的苦味酸三聚氰胺沉淀的质量，测定三聚氰胺的含量。升华法为 GB /T9567 中规定的第二种方法。在升华装置中将三聚氰胺试样在负压下进行加热，在三聚氰胺完全升华后，称其残渣量，即测得三聚氰胺纯度。上述两种测定方法准确度均较高，但操作繁琐，分析时间较长。 2． 1． 2 电位滴定法 此方法操作简便、快速、准确，利用电位滴相对标准偏差( RSD) 小。袁立勇等 定法测定溶液中三聚氰胺的含量，硫酸溶液和三聚氰胺反应生成弱酸性化合物。以 pH3 为终点指示，通过硫酸溶液的消耗体积计算三聚氰胺的含量，RSD≤0． 50% 。测定结果完全能够满足生产中间控制分析的需要。上述三种方法在测定工业三聚氰胺较为适用，但在检测食品或饲料中三聚氰胺含量很低，主要采用色谱法以及其它方法。 2． 2 食品和饲料行业的三聚氰胺检测方法国家标准《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》 GB /T 22388 － 2008 中规定了 3 种检测方法，分别是高效液相色谱法( HPLC) 、气相色谱－ 质谱法 ( GC – MS) 和液相色谱 － 质谱 / 质谱法( LC – MS / MS) 。对于饲料中三聚氰胺的检测，农业部发布农业行业标准《饲料中三聚氰胺的测定》( NY /T1372 – 2007) 规定其检测方法为 HPLC 法和 GC – MS 法，并以 GC － MS 为确证法。此外我国各个地方标准中也有专门针对食品和饲料中三聚氰胺的检测方法。 2． 2． 1 高效液相色谱法( HPLC) HPLC 是目前各项国家标准中应用比较广泛的测定方法之一，也是国家标准中的第一法。规定选用的色谱柱为 C8 柱、C18 柱，检测器有二级管阵列检测器( DAD) 和紫外检测器( UV) ，波长 240nm。因三聚氰胺结构中含有胺根，具有较强的极性，使其在传统的反相键合相上保留很差，接近于死时间流出，不能进行分析。为了增加三聚氰胺的保留时间，选用弱洗脱能力流动相。同时，三聚氰胺极易与 C18 柱残余的硅醇基形成氢键，使峰型拖尾，因此选用柠檬酸与辛烷磺酸钠缓冲液 － 乙腈为流动相。高效液相色谱法的定量限为 2mg /kg。 2． 2． 2 液相色谱 － 质谱 / 质谱法( LC – MS / MS) 2007 年美国食品药品监理局首先颁布了用于准确检测三聚氰胺含量的