河北省唐山市开滦第二中学高中生物 1.2.3基因工程的基本操作（三课时）导学案 新人教版选修3.docVIP

河北省唐山市开滦第二中学高中生物 1.2.3基因工程的基本操作（三课时）导学案 新人教版选修3 小组： 【学习目标】 1.掌握目的基因检测与鉴定的方法。 2.DNA分子杂交技术的原理。 3.总结基因工程操作中的一些注意事项 【重点难点】 重点: 目的基因检测与鉴定的方法。 难点：目的基因检测与鉴定的方法。 【自主学习】 目的基因的检测与鉴定 （1）为什么要检测与鉴定： （2）检测的内容与方法的比较 类型 步骤 检测内容 方法 结果显示 分子检测 第一步 目的基因是否进入受体细胞 是否成功显示出杂交带 第二步 目的基因是否转录出mRNA 是否成功显示出杂交带 第三步 目的基因是否翻译出蛋白质 是否成功显示出杂交带 个体水平鉴定 （3）目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是 。 （4）什么是探针？ 。 （5）DNA分子杂交技术的原理是 。 【问题生成】 【师生互动，问题探讨】 1.为什么需要进行个体生物学水平的鉴定？ 2.若要生产人的糖蛋白，可以用大肠杆菌吗？ 3.DNA分子杂交技术还有哪些应用? 4.DNA分子杂交与分子杂交有什么区别？ 5.基因工程的操作中，哪些过程发生碱基互补配对现象? 【课后小结与反思】 基因工程操作的8个易错点 (1)目的基因的插入位点不是随意的 基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位。 (2)基因工程操作过程中只有第三步(将目的基因导入受体细胞)没有碱基互补配对现象 第一步存在逆转录法获得DNA，第二步存在黏性末端连接现象，第四步检测存在分子水平杂交方法。 (3)原核生物作为受体细胞的优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。 (4)一般情况下，用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段，但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因，这样可避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接。 (5)目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中。 (6)不熟悉标记基因的种类和作用：标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞，常见的有抗生素抗性基因、发光基因(表达产物为带颜色的物质)等。 (7)对受体细胞模糊不清：受体细胞常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物(大肠杆菌、酵母菌)等。要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必须用真核生物酵母菌(需内质网、高尔基体的加工、分泌)；一般不用支原体，原因是它营寄生生活；一定不能用哺乳动物成熟的红细胞，原因是它无细胞核，不能合成蛋白质。 (8)还应注意的问题有：基因表达载体中，启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA)；终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。基因表达载体的构建是最核心、最关键的一步，在体外进行。 ①检测受体细胞是否有目的基因　检测受体细胞是否有致病基因　检测目的基因是否转录mRNA　检测目的基因是否翻译蛋白质 A．　B．　C．　D． 2.在基因工程操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A.人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合C.目的基因的检测和表达 D.将目的基因导入受体细胞 3.苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞是否已表达，其检测方法是（ ） A．是否有抗生素抗性 　　　 B．是否能检测到标记基因 　C．是否有相应的性状　　　 D．是否能分离到目的基因 (1)获取目的基因后，短期内要得到大量目的目的基因，可利用_______________扩增。 (2)构建基因表达载体的过程要使用的工具酶有___________。 (3)受体种类不同，导入方法不同。选育优良动物，目的基因导入的常用方法是__________；选育优良植物，目的基因导入采用最多的方法是_______。目的基因进入动植物细胞并且在受体细胞维持稳定和表达的过程，称为__________________。 (4)检测目的基因在转基因生物中是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物的体细胞中提取蛋白质，用相应的抗体进行________杂交，看是否有 。 6.根