蛋白质的转运加工与修饰.pptVIP

第四章 蛋白质的转运、加工与修饰 第一节 蛋白质的转运、到位 第二节 蛋白质的加工与修饰 第一节 蛋白质的转运、到位 一、蛋白质转运与分拣信号 1. 信号序列（斑块） 2. 跨膜疏水区信号 3. 分拣信号 内质网（endoplasmic reticulum, ER）信号序列：存在于所有分泌蛋白质前体中。通常位于肽链 N-terminus ，引导新生肽链从细胞质进入内质网 基质（matrix）信号序列：引导新生蛋白质从细胞质进入细胞器基质的跨膜转运 内膜腔（intermembrane space）信号序列：新生蛋白质先进入基质，基质信号序列被切除，露出的内膜腔信号序列再引导蛋白质进入内膜腔（即内、外膜间隙） 信号-锚定序列（signal-anchor sequence）：穿膜蛋白中的一段独特信号序列，其作用是将这些蛋白质锚定在脂双层膜上。。信号序列常位于链内，其序列两端的荷电位置决定该蛋白在细胞膜上的朝向（序列中带正电荷端总是朝向细胞质侧）。 停止转运-锚定序列（stop transfer-anchor sequence） ： 停止新生肽的转运并锚定在内质网膜中。 3. 分拣信号（sorting signal） 　　新生蛋白质通常具有信号肽：肽链N端或C端或肽链的内部的一段15-60个氨基酸的连续氨基酸序列。 　　分拣信号：是存在于蛋白质中，能被特异的受体所识别，从而引导蛋白质到达细胞的指定地点。 　　 如在溶酶体降解的蛋白：KFERQ或RIDKQ（自噬性模体） 　　　滞留内质网的蛋白：KDEL 二、分子伴侣（molecular chaperones） 分子伴侣：非共价地与新生肽链和解折叠的蛋白质肽链结合，并帮助其折叠和转运，通常不参与靶蛋白的生理功能。 分子伴侣的功能： 　?指导合成肽链正确折叠； 　?使肽链保持伸展状态，有利于蛋白质的分拣和跨膜转运； 　?应激状态下，防止蛋白质变性后内部疏水基团暴露而发生不可逆的凝集； 　　另外，还参与新复制DNA与组蛋白装配成染色质，蛋白质的降解，类固醇激素受体的变构，某些酪氨酸蛋白激酶的活化等多种生理生化过程. 分子伴侣的分类 按分子量大小分类，尚无明确界定。 (1)伴侣蛋白（chaperonin ） ： 　具有独特双层7-9元环状结构的寡聚蛋白,包括GroEL蛋白和热激蛋白60等 。功能：蛋白质正确折叠和亚基组装。 (2)应激蛋白70家族(Stress-70 family)：一类分子量约70kD的高 度保守的ATP酶，广泛分布于原核和真核细胞中，如大肠杆菌胞浆 DnaK/DnaJ,高等生物内质网Bip,Hsc1,Hsc2,Hsc4或hsc70,胞浆 Hsp70,Hsp68和Ssal4p,线粒体中的Ssclp,Hsp70等。 (3)应激蛋白90家族(Stress-90family):分子量90kD左右,如大肠 杆菌胞浆HtpG,酵母胞浆Hsp83与Hsc83,果蝇胞浆Hsp83,及哺乳类 胞浆Hsp90与内质网Grp94（Erp90或内质网素endoplasmin）等. 其他分子伴侣： 　eg.核质素,T受体结合蛋白(TRAP),大肠杆菌的SecB和触发因子 （trigger factor）及PapD,噬菌体编码的支架蛋白(scaffolding proteins)等均具有重要的分子伴侣功能。 　eg.嗜热菌枯草芽孢杆菌中的“冷激”蛋白Bs-CspB和它的嗜热伴侣 Bc-Csp分别为67和66AA,3D结构相似，仅12AA（均在分子表面）差 异，但Tm值分别为54℃和77℃，突变分析表明，只有Arg3和Leu66 对Tm产生重大影响。 　分子伴侣不仅与胞内蛋白的折叠与组装密切相关，还影响蛋白 质的转运、定位或分泌；也与信号转导中信号分子的活性相关。 Hsp70介导的蛋白质折叠 三、翻译同步转运和翻译后转运 真核细胞所有蛋白质的起始合成都是在游离核糖 体上 1.翻译同步转运（co-translational translocation） 2.翻译后转运（post-translational translocation） 高尔基体 内质网 1.翻译同步转运（co-translational translocation） 翻译同步转运：在游离核糖体上合成蛋白质N-端信号序列,信号 序列指导核糖体与内质网膜结合，使新生肽链边合成边进入 内质网腔(ER lumen）. 进入内质网腔或膜的蛋白质: 一部分留在内质网； 另一部分形成转运小泡（transport visicle）被运输到 各网状内皮系统，并分泌或处理. 调控型分泌（regulated secretio