第八章常用免疫学检查3-23分解.ppt

临床常用免疫学检查 胡正军浙江省中医院检验科hu209ster@ 基本概念 免疫 免疫是指机体接触“抗原性异物”或“异己成分”的一种特异性生理反应，其作用是识别和排除抗原性异物， 以此维持机体的生理平衡。这些维持机体稳定性的反应，通常对机体是有利的：但在某些条件下也可以是有害的。 现代免疫学认为：以下几种生理功能： (1)免疫防御；指机体排斥外源性抗原异物的能力。这是动物藉以自净、不受外来物质干扰和保持物种纯洁的生理机制。 (2)免疫自稳；指机体识别和清除自身衰老残损的组织、细胞的能力，这是机体藉以维持正常内环境稳定的重要生理机制。这种自身稳定功能失调时易导致某些生理平衡的紊乱或者自身免疫病。 (3)免疫监视：指机体杀伤和清除异常突变细胞的能力，机体藉以监视和抑制恶性肿瘤在体内生长。一旦功能低下，宿主易患恶性肿瘤。 免疫学检验 免疫学检验又称检验免疫学，是研究免疫学技术及其在医学领域中的一门应用学科． 免疫学检验的检测对象是具有免疫活性的物质，内容包括检测方法和临床意义． 免疫学检验可分为细胞免疫检验和体液免疫检验两大类。 利用抗原抗体反应来测定标本中微量物质的方法称为免疫测定。免疫测定具有高度的特异性和敏感性． 淋巴细胞标志和功能检测 人体内的淋巴细胞可分为T细胞、B细胞和包括NK细胞为代表的三群细胞分若干亚群，各有其特异的表面标志和功能，据此建立相应许多相应的检测方法 T细胞表面标志物的检测 1．特异性抗原检测 用单克隆抗体检测T细胞表面抗原的方法有两大类，一类是用标记抗体着染，另一类用抗体致敏的红细胞作花环试验。 2．特异性受体的检测原理 T细胞表面有特异性绵羊红细胞(E)受体，当人的T细胞与绵羊红细胞悬液按一定比例混合后，置4C至少2小时或过夜，T细胞表面的E受钵可与绵羊红细胞结合形成玫瑰花样的花环，称为活性E(Ea)花环。检测Ea花环形成细胞可反映受检者的细胞免疫水平。 B细胞表面标志物的检测 B细胞表面抗原检测原理 B细胞表面的CD19、CD20、CD21CD22和CD29等分化抗原，有些系全部B细胞所共有，而有些仅活化B细胞所特有，因而可用相应的CD系列单克隆抗体，通过间接荧光免疫法，酶免疫组化或ABC法加以检测。 肿瘤标志物 肿瘤标志物可被定义为作为肿瘤细胞合成和释放的生物性物质或由宿主响应肿瘤组织而产生的物质。 肿瘤标志物分类大致有两种:其一按肿瘤标志物的来源，第二个肿瘤标志物本身的化学特性。 按后者的分类主要包括: ①肿瘤胚胎性抗原标志物; ②糖类标志物; ③酶类标志物; ④激素类标志物; ⑤蛋白质类标志物; ⑥基因标志物。 一种理想的肿瘤标志物应具有满足分析的和临床的需要两方面的特性. 临床的需要对疾病的高灵敏度(没有假阴性结果，能检测微转移)对疾病的高特异性(没有假阳性结果，在无病个体中阴性)水平应反映出肿瘤的大小在病情稳定的患者中水平应保持相对地恒定并且没有波动在完全缓解的患者中应该检测不到或是低的在病情稳定的患者中应能预测结果 常见的肿瘤标志物及其应用评价 肿瘤胚胎性抗原标志物 (1)癌胚抗原(CEA):CEA是由胎儿胃肠道上皮组织、胰和肝的细胞所合成，通常在妊娠前6个月内CEA含量最高，出生后血清中含量已很低下，健康成年人血清中CEA浓度小于2·5ug/L。在临床上，当CEA大于6Oug/L时，可见于结肠癌、胃癌和肺癌。 (2)甲胎蛋白(AFP):妊娠的妇女的血和尿中AFP含量会持续增高，从妊娠6周开始合成，至12~15周达高峰。胎儿血浆中的AFP值可达到3mg/ml，出生后，AFP合成很快受抑制，其含量降至5Oug/L，周岁末婴儿的浓度接近成人水平，一般健康成人血浆AFP浓度低于25ug/L。 AFP是原发性肝癌的最灵敏、最特异的肿瘤标志，血清AFP测定结果大于5OOug/L以上，或含量有不断增高者，更应高度警惕。肝癌患者血清AFP含量变化的速率和程度与肿瘤组织分化程度高低有一定相关性。分化程度较高的肿瘤AFP含量常大于200ug/L。 糖类抗原标志物 糖类抗原标志物，肿瘤标志物相关物质是指由肿瘤细胞表面的抗原物质或者是肿瘤细胞所分泌的物质，这类物质又是单克隆抗体，