2011 第二单元 二相反应解析.ppt

2.1.1 与糖基结合 2.1.2 与硫酸结合 2.1.3 乙酰化结合 2.1.4 氨基酸结合 2.1.5 谷胱甘肽结合 2.1.6 甲基化 1）O-甲基化 2）N-甲基化 UGT1A1基因启动子特征 TATA 启动子区域 Variable repeats of thymine-adenine (TA) WILD TYPE promotor (UGT1A1*1) = 6 TA repeats 3 variant alleles with 5, 7 and 8 TA repeats ? (TA)5, (TA)7, (TA)8 respectively. (TA)7 polymorphism – UGT1A1*28 Homozygous genotype 10% of North Americans 2 alleles have 7 TA repeats ? 7/7 (TA)5 (TA)8 – less common, African origin 实例： .au/.../sld063.htm 谷氨酰胺结合物还可以进一步在酶催化下，逐级分解，最终产生硫醚氨酸或巯基尿酸。 R R 谷氨酰胺酶 肽酶 乙酰基转移酶 巯基尿酸结合 谷胱甘肽结合物可直接从尿液、胆汁中排泄也可继续代谢： -脱去谷氨酸和甘氨酸，再将乙酶辅酶A的乙酰基转移到半胱氨酸的氨基上 ?? -形成巯基尿酸排出体外 大剂量对乙酰氨基酚中毒： –代谢物与谷胱甘肽的结合为主要的代谢途径 ??体内供结合用的葡萄糖醛酸和硫酸盐被耗尽 – 当肝脏内谷胱甘肽的消耗无供应时，会使代谢物N-乙酰对苯醌亚胺在体内蓄积 –亲核性的代谢物可与细胞内大分子共价结合 2.1.6 甲基化反应 甲基化反应不能改善水溶性,但一般降低药物的反应性 甲基化供体为SAM(S-adenosylmethiomine) 底物:胺类,醇羟基,酚羟基,咪唑基团等 各种甲基转移酶 对一些儿茶酚胺如肾上腺素的灭活代谢起着重大的作用） 甲基化反应特点 甲基化反应特点 含N、O、S的基团都能进行 需在甲基化转移酶催化下进行 –在镁离子和儿茶酚-3-O-甲基转移酶(COMT)的催化下，可使儿茶酚结构的药物甲基化 –苯乙醇胺-N-甲基转移酶（PNMT）可催化苯乙醇胺类如麻黄素甲基化 百浪多息(一种磺胺类药） 2.2 尿苷葡萄糖醛酸转移酶（UGTs） 外源化合物 （Xenobiotics）的二相代谢最主要酶是UGTs。机体中，存在多种UGTsd基因形式，形成UGT超家族。 目前通过对典型的UGTGA解毒机制研究，已经证实人体各种GA结合反应均有由15种UGT酶催化，各个UGT同功酶的底物享有一定的重叠性，即 绝大多数情况下，底物结合GA后失活，只有极少数例外。 一种UGT酶可以催化多种底物GA结合 一种底物可以被多种UGT酶催化GA反应 UGTs 与CYPs 的差别： 在内质网上的定位：UGTs 蛋白质大部分在内质网内腔，因内质网膜屏障药物及辅因子进入而造成代谢滞后现象；CYPs则锚定在内质网膜靠细胞溶胶侧，蛋白质及其活性中心均在细胞液中。 UGTs家族成员，蛋白质C-端结构氨基酸序列同源性较高，而N端的变异性大。一般认为前者是葡萄糖醛酸基结合域，后者则是决定酶的底物选择性的区域。 UGT1A家族成员，一般基因结构上共有5个外显子，只有第一个外显子各异，而其余4个外显子相同。 编码UGT1A同工酶的基因簇在2号染色体长臂端(2q37) 该族基因的特点是含有13个可变的 exon 1 及其相应的启动子序列, 接下来是共享的2,3,4,5 四个外显子序列 已鉴定出四个exon1 是假基因(pseudogenes)。 每一个5’-端的exon1 都可以与后面的四个外显子拼接形成9种不同的UGT酶, 即N’- 端不同(识别底物)而C-端相同(结合糖醛酸)的UGTs 各个exon 1 编码 底物结合区域并受到自有的启动子调控. 2.2.1 UGT1A1基因家族 UGT基因发生突变,可能引起一系列的病变,包括胆酸代谢异常和癌症发生. Gilbert syndrome (GS) : 最初被普遍认为是UGT1A1 启动子序列中插入TA碱基所致,但续后研究发现约40%人群具有该突变却并无高胆红素症.说明此突变是高胆红素症的必要但非唯一条件. 目前已证实, 与其它的UGT1A1突变结合, GS症风险增加. 非结合性高胆红素血症 Hyperbilirubinemia familial transient neonatal (also called breastfeeding jaundice) 亦与UGT1A突变相关.单纯UGT1A突变对