9吸光光度法讲稿.ppt

第9章 分光光度法 Spectrophotometry 9.1 概述 9.2 光吸收基本定律 9.4 显色反应和显色条件 9.3 分光光度计 9.5 光度测定条件及误差控制 9.6 分光光度方法及应用 主要内容 9.1 概述 在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为分光(吸光)光度法。 红外吸收：分子振动，吸收光波长范围0.75?1000 ?m ，主要用于有机化合物结构鉴定。 本章主要讲授可见吸光光度法 紫外吸收：电子跃迁，吸收光波长范围200?400 nm(近紫外区)，可用于结构鉴定和定量分析。 可见吸收：电子跃迁，吸收光波长范围400?750 nm ，主要用于有色物质的定量分析。 分光光度法特点 灵敏度高：测定下限可达10-5～10 -6mol·L-1, 10-4 ％～10-5 ％ 操作简便快速 应用广泛 准确度能够满足微量组分的测定要求： 相对误差2～5％ 9.1.1 光的基本性质 光是一种电磁波，具有波粒二象性。 光的波动性：用波长?、频率?、光速c等参数来描述。 ? ? = c 光的粒子性：光子流，如光电效应，光的吸收和发射等现象。 光子的能量： E = h ? = h c / ? 可见光区：400-750 nm 紫外光区：近紫外区200 - 400 nm 远紫外区10 - 200 nm (真空紫外区) 红外光区： 9.1.2 物质对光的选择性吸收 M + 热 M + 荧光或磷光 M + h ? ? M * 基态 激发态 E1 （?E） E2 单色光：具有同一波长的光。 复合光：由不同波长光组成的混合光，如日光。 互补光：白光可由两种颜色的光混合而成，这两种光称为互补色光。 物质的颜色：对不同波长的光选择性吸收，反射光的颜色。 溶液的颜色：吸收光的互补光色，透过光的颜色。 白光 青蓝 青 绿 黄 橙 红 紫 蓝 互补色光 硫酸铜溶液，吸收黄光呈现蓝色。 高锰酸钾溶液，吸收绿光呈现紫色。 物质的颜色 吸收光 颜色 波长范围( ? ,nm) 黄绿 黄 橙 红 紫红 紫 蓝 绿蓝 蓝绿 紫 蓝 绿蓝 蓝绿 绿 黄绿 黄 橙 红 400-450 450-480 480-490 490-500 500-560 560-580 580-600 600-650 650-750 互补色 9.1.3 吸收曲线(吸收光谱) 入射光强度 I0 透射光强度 It 吸收光强度 Ia 反射光强度 Ir Io = Ia + It + Ir 分光光度法中： Io = Ia + It 透光度或透光率 T： 吸光度 A： A~?作图 不同浓度KMnO4溶液的吸收曲线 吸收曲线 (吸收光谱) 吸收曲线的讨论 (1) 同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax 。 (2) 不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax 不变。不同物质的吸收曲线形状和λmax 则不同。(物质定性分析的依据) (3) 不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 有差异，A 随浓度的增大而增大 。(物质定量分析的依据) (4) 在?max处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。(吸收曲线是选择入射光波长的重要依据) 9.2 光吸收基本定律 朗伯定律(1760年) A = lg(I0/It) = k1b 比尔定律(1852年) A=lg(I0/It)=k2c 当入射光的? 、吸光物质的c 一定时，溶液的吸光度A与液层厚度b成正比。 当入射光的? ，液层厚度b 一定时，溶液的吸光度A与吸光物质的c成正比 朗伯-比尔定律 A = lg(I0/It) = kbc 一束平行单色光通过有色溶液时，溶液的吸光度A与液层厚度b和溶液浓度c的乘积成正比。 k—比例常数，与溶液性质，T，?有关 k值随c的单位不同而不同(液层厚度以cm为单位)。 c/g·L-1 A=a bc a——吸光系数 单位: L·g-1 ·cm-1 c/mol·L-1 A= e bc ? ——摩尔吸光系数 单位: L·mol-1 ·cm-1 摩尔吸光系数? 表示吸光物质浓度为1mol/L，液层厚度为1cm时溶液的吸光度。 ? 值越大，溶液的吸光能力越强，显色反应的灵敏度越高。 ? 是吸光物质在特定波长下的特征常数，不同波长下?不同。 ? 104 为低