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斐林试剂
苏丹Ⅲ
橘黄色
红色
砖红色沉淀
紫色
苏丹Ⅳ
双缩脲试剂
鉴定物质
试剂
实验现象
还原性糖
脂肪
蛋白质
淀粉
碘
蓝色
必修1第18~19页
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
比较项目
试剂及成分
原理
溶液浓度
方法
加热与否
结果
可溶还原糖的鉴定
斐林试剂NaOH和CuSO4
砖红色沉淀
蛋白质的鉴定
双缩脲试剂NaOH和CuSO4
溶液呈紫色
4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?
新配制的Cu(OH)2
溶液与加入的葡萄糖,在加热条件下生成砖红色的Cu2O
在碱性
环境下
的Cu2+,与类似于双缩脲结构的肽键发生反应生成紫色终合物
NaOH
浓度为
0.1g/mL
CuS04
浓度为0.05g/mL
NaOH
浓度为
0.1g/mL
CuS04
浓度为0.01g/mL
先把NaOH
溶液和CuSO4
溶液混合,
而后立即使用。
先加入Na0H
1mL,然后
再加CuS04
4滴,摇匀。
(不能过量)
水浴
加热
不
需
要
5、实验的材料的选择和处理有什么要求?
材料的选择
材料的处理
还原性糖的鉴定
脂肪的鉴定
含糖高,颜色为
白色的植物组织,
如苹果和梨
富含脂肪的种子
,如花生
浸泡3~4小时
/
蛋白质的鉴定
富含蛋白质的
黄豆或鸡蛋清
黄豆需浸泡1-2天,鸡蛋清要先稀释
淀粉的鉴定
马铃薯
/
选材:含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对
显色的干扰),苹果、梨最好 。
实验流程(步骤)
1.可溶性还原糖
制备组织样液:
制浆:去皮、切块、研磨,
过滤:(用单层纱布)
取液:(2mL)
显色反应
现象:
(用前混匀)
50~65.C水浴
加热2min
还原糖的检测结果
2.脂肪的鉴定
取材:花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片
制片:
①选取最薄的薄片移至载玻片中央
②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 染液2 - 3滴,染色
2-3min
③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色
(多余的苏丹Ⅲ )
④吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片
显微观察:
先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察
现象:
有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒
脂肪的检测结果
3.蛋白质的鉴定
选材与制备
组织样液:
黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)
[黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液]
显色反应
现象:
无色
紫色或紫红色
(创设碱性条件)
(提供Cu2+)
蛋白质的检测结果
4.淀粉的鉴定
取材:马铃薯匀浆
检测:
碘液2滴
现象:
摇匀后变成蓝色
问题探讨:
1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液?
作对照
2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3~4滴而不能
过量?
过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。
3、为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久?
时间太长,Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。
深化
1、(山东)从细胞腊上提取了某种成分,用非酶法处理
后,加入双缩脲剂出现紫色;若加入斐林试剂或班氏试剂
并加热,出现砖红色。该成分是:
A 糖脂 B 磷脂 C 糖蛋白 D 脂蛋白
C
练习
解析:用双缩脲试剂处理该物质会产生紫色反应,说明其含蛋白质;加入斐林或班氏试剂在加热条件下会产生砖红沉淀,说明该成分含糖。即该成分含蛋白质又含糖,由此判断该成分为糖蛋白。
2、(2011.广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是( )
A、可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀
B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜
C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热
D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用
A
3、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,肯定不需要用到的化学试剂是( )
A.斐林试剂 B. 红墨水
C.双缩脲试剂 D.苏丹Ⅳ染液
B
各种可供实验的材料
梨
黄桃
胡萝卜
黄豆
花生种子
小麦种子
①其中适合于鉴定可溶性还原糖的是 ,理由是梨的组织细胞 ,你打算用什么试剂鉴定? 。
②小
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